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为了评估人在摄入猪肉这一中国最普遍的肉制品后弓形虫传播给人的风险并确定其主要基因型,本文从安徽省四个地区的零售肉摊购买新鲜猪瘦肉样本416份,其中合肥101份,肥东100份,肥西114份,长丰101份。每个样本通过荧光定量PCR检测组织样本中弓形虫DNA及ELISA检测组织液中抗弓形虫抗体。14个组织液ELISA和荧光定量PCR同时阳性的组织接种小鼠分离虫株。最后获得1个分离株,为了观察这株的毒力,10只6周龄的小雌鼠,每只小鼠腹腔注射1000个速殖子。逐日观察并记录小鼠的死亡情况。为了确定这一猪肉中分离的弓形虫基因型,对1个分离株和7个具有较高弓形虫浓度的阳性DNA样本使用9个基因位点SAG2, SAG3, BTUB, GRA6, L358, PK1, c22-8, c29-2和Apico的PCR-RFLP方法进行分型。
结果:416份样本中ELISA阳性的有一42个,阳性率为10.1%:荧光定量PCR阳性有75个,阳性率为18.03%0 14个荧光定量PCR和ELISA同时阳性的样本接种小鼠后分离到一个虫株((Tgpkix 171),腹腔接种10只小鼠均在5-10天内死亡,提示该分离株为强毒株。在PCR-RFLP的分型结果中只有分离株和两个阳性DNA样本在所有位点具有完整数据。分离株(Tgpkfxl7l)属于ToxoDB#9(基因型Chinese 1)。两个阳性的DNA样本(Tgpkhf2和Tgpkhf3)属于ToxoDB#213,该基因型为首次报道。另外5个阳性DNA样本只能在部分位点被分型。
结论:安徽省市售猪肉弓形虫感染PCR阳性率为10.1%,同时从猪肉中分离到活的弓形虫,提示人在摄入未经检验检疫的未熟猪肉后有感染弓形虫的风险;ToxoDB#9 (Chinese 1)和ToxoDB#213基因型可能是这一区域猪肉中弓形虫的主要基因型。
结果:416份样本中ELISA阳性的有一42个,阳性率为10.1%:荧光定量PCR阳性有75个,阳性率为18.03%0 14个荧光定量PCR和ELISA同时阳性的样本接种小鼠后分离到一个虫株((Tgpkix 171),腹腔接种10只小鼠均在5-10天内死亡,提示该分离株为强毒株。在PCR-RFLP的分型结果中只有分离株和两个阳性DNA样本在所有位点具有完整数据。分离株(Tgpkfxl7l)属于ToxoDB#9(基因型Chinese 1)。两个阳性的DNA样本(Tgpkhf2和Tgpkhf3)属于ToxoDB#213,该基因型为首次报道。另外5个阳性DNA样本只能在部分位点被分型。
结论:安徽省市售猪肉弓形虫感染PCR阳性率为10.1%,同时从猪肉中分离到活的弓形虫,提示人在摄入未经检验检疫的未熟猪肉后有感染弓形虫的风险;ToxoDB#9 (Chinese 1)和ToxoDB#213基因型可能是这一区域猪肉中弓形虫的主要基因型。