耐药白假丝酵母菌ERG11基因突变分析

来源 :2014中国医师协会妇产科医师大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:blus95
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  目的:研究外阴阴道念珠菌临床分离株的流行病学特点,监测其对常见抗真菌药物的耐药性,为临床合理用药提供依据.在此基础上分析白念珠菌对唑类耐药临床分离株ERG 11的基因突变,并探讨与耐药的关系.方法:将收集来的阴道分泌物用沙堡氏琼脂培养基培养,分离纯化菌株,挑取典型菌落,制成菌悬液后,用CHROMagar显色培养基进行菌株鉴定,同时挑取典型菌落按照美国国家临床试验标准化研究所(CLSI)推荐的《酵母菌的液基稀释法抗真菌药物敏感试验参考方案第二版》(M27-A2)方案测定21 2株白色假丝酵母菌对氟康唑,伊曲康唑,两性霉素B及伏立康唑四种抗真菌药物的敏感性.采用美国临床实验室标准化协会(CLSI)公布的《酵母菌液基稀释法抗真菌药物敏感试验参考方案6(M-27方案)测定初筛耐药株对氟康唑和伊曲康唑,两性霉素,伏立康唑的MIC,选择白假丝酵母菌耐药株(FLZ> 64ug/ml,ITZ> 1ug/ml,两性霉素>4,伏立康唑>4)和敏感对照株(FLZ MIC《8ug/ml,ITZ MIC《0.125ug/ml,两性霉素MIC《1ug/ml,伏立康唑MIC《1ug/ml.提纯培养扩增目的菌株,提取其基因组DNA,利用DNA Primer软件辅助设计一对PCR引物,以提取的目的DNA为模板,扩增ERGⅡ基因全序列,扩增后的PCR产物经纯化后测序,将测序结果与GenBank中己知标准序列(X13296)进行比较分析.
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