【摘 要】
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目的:建立多重FQ-PCR方法同时检测不动杆菌及常见碳青霉烯酶基因. 方法:针对不动杆菌特异基因及常见碳青霉烯酶基因设计引物,建立2组多重FQ-PCR方法结合熔解曲线法分析靶
【机 构】
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南方医科大学南方医院检验医学科,广东广州 510515
【出 处】
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第九届粤桂琼检验医学学术会议暨海南省医学会检验医学专业委员会2015年学术年会
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目的:建立多重FQ-PCR方法同时检测不动杆菌及常见碳青霉烯酶基因.
方法:针对不动杆菌特异基因及常见碳青霉烯酶基因设计引物,建立2组多重FQ-PCR方法结合熔解曲线法分析靶基因,并对方法进行评价.
结果:建立2组多重FQ-PCR方法,1组同时检测不动杆菌属recA基因、鲍曼不动杆菌16S-23S rRNA ITS基因、NDM基因,另1组同时检测OXA-23-l ike、OXA-24-1i ke、OXA-51-like、OXA-58-like基因.两组多重FQ-PCR方法均可特异扩增靶序列并呈现特异熔解峰,最低可检测靶基因10拷贝/反应,在检测靶基因10-106范图内相关系数0.98,批间、批内重复试验Ct值变异系数均小于5％.检测临床分离的400株耐碳青霉烯不动杆菌,利用普通PCR及基因测序为对照方法,检测结果均一致.粪便模拟标本中各类耐碳青霉烯不动杆菌的检测最低浓度均为102cfu/ml.
结论:本研究建立的2组多重FQ-PCR方法能同时检测不动杆菌及常见碳青霉烯酶基因,方法特异性好、灵敏度高、线性关系好、成本低,在医院泛耐药不动杆菌的监测和防控方面具有广阔的应用前景.
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