【摘 要】
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<正>目的:建立一种适合基层现场的鸡沙门氏菌病抗体的免疫胶体金试纸条。方法:本试验以鸡沙门氏菌的基因组为模板,利用PCR方法扩增invA基因并进行原核表达后,用Ni-NTA纯化Inv
【机 构】
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石河子大学动物科技学院; 石河子大学生命科学学院;
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<正>目的:建立一种适合基层现场的鸡沙门氏菌病抗体的免疫胶体金试纸条。方法:本试验以鸡沙门氏菌的基因组为模板,利用PCR方法扩增invA基因并进行原核表达后,用Ni-NTA纯化InvA融合蛋白,Western blotting和ELISA进行分析;采用30 nm的胶体金溶液标记山羊抗鸡IgY,并对金标抗体的浓度和pH值进行优化;在NC膜上分别包被InvA融合蛋白和鸡IgY,作为检测线和质控线,评估其特异性、灵敏性和稳定性。最后用该方法对临床的195份血清进行检测,平板凝集试验验证其准确性。结果:构建的重组质粒pMD19-T-invA在大肠杆菌BL21中成功高效表达,获得的蛋白纯度较高,经Western
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