珍稀名贵中药材铁皮石斛的鉴别研究

来源 :2016首届中国中药资源大会暨CSNR中药及天然药物资源研究专业委员会第十二届学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:cqsuifeng
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  铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)是传统名贵中药材,为兰科石斛属(Dendrobium)多年生附生草本植物,铁皮枫斗是以铁皮石斛茎加工炮制的名贵药材.现代医学研究表明铁皮石斛具有抗氧化、提高免疫力、降血糖和降血脂的功效,并已广泛用于抗肿瘤、糖尿病、免疫力低下等疾病的治疗.2010版《中华人民共和国药典》将其作为新增品种从石斛中单列出来,并详细介绍了铁皮石斛的基源、鉴别、检测标准及功效等.但由于铁皮石斛野生资源枯竭和栽培种植成本居高不下,国内药材市场流通着大量由其他石斛属植物加工的枫斗,如紫皮石斛加工的紫皮枫斗等,易与铁皮枫斗混淆,常做伪品充斥其中,而现有的铁皮石斛标准尚不能有效的将它们区分鉴别.本研究在分离铁皮石斛专属性成分基础上,研究铁皮石斛薄层色谱鉴别方法,并基于HPLC、LC-MS、DNA序列分析等方法,对铁皮石斛进行鉴别研究.在现有《中国药典》铁皮石斛薄层色谱鉴别方法基础上,对铁皮石斛薄层定性鉴别方法进行了修订研究,通过方法学考察,建立了优化的铁皮石斛薄层色谱鉴别新方法,该方法专属性强,操作简单,重复性好,可有效的将铁皮石斛与易混淆近缘种紫皮石斛区分鉴别.比较铁皮石斛与紫皮石斛的薄层色谱色谱行为,确定了铁皮石斛专属性成分,并运用MCI柱色谱、凝胶分子筛和制备液相等系统化学分离方法,针对铁皮石斛中的专属性成分进行分离纯化,分离得到其专属性成分佛来心苷.以佛来心苷、异佛来心苷以及夏佛塔苷为铁皮石斛定性鉴别的指标性成分,运用已建立的铁皮石斛薄层色谱鉴别方法,分别对7种石斛枫斗(铁皮枫斗、紫皮枫斗、大包鞘枫斗、刚节枫斗、报春枫斗、水草枫斗、美花枫斗)和8种石斛类药材(铁皮石斛、紫皮石斛、串珠石斛、金钗石斛、鼓槌石斛、叠翘石斛、束花石斛、兜唇石斛)进行薄层色谱分析,结果显示,所有枫斗和石斛药材都能有效的区分,表明该薄层方法不仅能用于铁皮石斛的定性鉴别,还可以用于石斛属不同来源的枫斗与药材的鉴别.采用高效液相色谱法建立了铁皮石斛、紫皮石斛的指纹图谱.通过相似度软件分析,生成的铁皮石斛HPLC指纹图谱有15个共有峰,且相似度达到0.873~0.962,而紫皮石斛HPLC指纹图谱相似度达到0.906~0.979.通过主成分分析(PCA)发现,PCA得分图和PLS-DA得分图能够将10批铁皮石斛和10批紫皮石斛有效的区分鉴别.运用液质联用(HPLC-MS/MS)对铁皮石斛的指纹图谱中的主要化学成分进行指认,通过化合物的保留时间、相对分子质量、二级或多级质谱裂解碎片,确定了铁皮石斛中的26种化学成分,包括14个黄酮类化合物、5个酚酸类化合物和1个木脂素类化合物,其中有4种化合物首次在铁皮石斛中发现.以佛来心苷与异佛来心苷为定性指标,运用LC-MS的方法可将铁皮石斛与紫皮石斛鉴别.
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