蝎毒素ITX氨基酸含量分析及蛋白质组学研究

来源 :第七届全国中医药生物化学与分子生物学学术交流会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ade4444
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目的:测定蝎毒素ITX的氨基酸含量,分析其蛋白质的组成。并对其中某些组分进行鉴定。 方法:将常压柱分离得到的蜗毒素蛋白ITX,进行氨基酸含量分析;以17cmpH3~10固相pH梯度胶条(immobilized pH gradiednt,IPG)为第一向IEF,18%SDS聚丙烯酰胺凝胶为第二向进行双向电泳(2-D);PDQuest7-1分析软件分析电泳图谱,筛选目的蛋白,然后对其中两个蛋白点进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix assisted laserdesorption ionization time of flight massspectrometry,MALDI-TOF-MS)和串联质谱(MS/MS)分析。得到肽质量指纹图谱(peptide massfingerprinting PMF)数据.登陆网站http://www.matrixscienee.com,用Mascot程序检索NCBInr数据库,鉴定蛋白质。 结果:ITX17种氨基酸的含量从0.14%~11.35%不等;从蝎毒素ITX蛋白样品中共筛选出9个等电点不同,分子量约为5.8kDa的蛋白点,其中蛋白点1、2、3、4位于酸性区,蛋白点5、6、7、8、9位于碱性区。获得了蝎毒多肽的PMF数据。 结论:测定了蝎毒素ITX蛋白的氨基酸含量,其中半胱氨酸含量可能比较高,易于形成二硫键,加大了解聚难度;建立蝎毒素ITX蛋白质组学研究方法。为后续工作奠定了基础。
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