【摘 要】
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目的 观察miR-203与P63在人表皮干细胞和角质形成细胞中的表达变化,探讨其在表皮增殖分化中的作用及意义.方法:(1)采用酶消化和Ⅳ型胶原快速贴壁相结合方法获得人表皮干细
【机 构】
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330006 南昌大学第一附属医院烧伤研究所
【出 处】
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2014感染伤口的防治与修复研讨会、中国金属学会冶金安全与健康分会烧伤外
科学专业委员会年会、华北地区烧伤与整形外科学术
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目的 观察miR-203与P63在人表皮干细胞和角质形成细胞中的表达变化,探讨其在表皮增殖分化中的作用及意义.方法:(1)采用酶消化和Ⅳ型胶原快速贴壁相结合方法获得人表皮干细胞及角质形成细胞.倒置显微镜下观察培养细胞的生长状况,免疫细胞化学染色法行β1整合素、CK19、CK1、CK10单克隆抗体检测鉴定.(2)Trizol一步法分别提取每组细胞总RNA,甲醛变性胶电泳质检.逆转录实时定量PCR技术检测表皮干细胞与角质形成细胞中miR-203基因及P63基因表达量;Western blot法检测细胞P63蛋白表达量.结果:角质形成细胞miR-203基因的表达明显高于表皮干细胞;角质形成细胞中P63基因及蛋白的表达较表皮干细胞显著降低(P<0.05).miR-203与P63基因及蛋白表达均呈负相关,相关系数分别为-0.64及-0.68(P<0.05).结论:miR-203与P63在人表皮干细胞和角质形成细胞中的表达有显著差异并呈负相关,提示miR-203可能通过负向调控P63的表达参与表皮干细胞的增殖与分化.
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