【摘 要】
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根据本室2004年分离的H1N1亚型猪SIV血凝素基因序列设计并合成特异性引物,以该病毒为模板扩增缺失信号肽和跨膜区的血凝素基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a中.在大肠杆菌
【机 构】
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华中农业大学动物医学院农业微生物国家重点实验室,武汉,430070
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物传染病学分会第十二次学术研讨会
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根据本室2004年分离的H1N1亚型猪SIV血凝素基因序列设计并合成特异性引物,以该病毒为模板扩增缺失信号肽和跨膜区的血凝素基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a中.在大肠杆菌中获得高效。通过Wesern Blot实验证明该表达产物具有免疫学活性,蛋白分子量约为55ku.利用亲和层析原理纯化蛋白作为包被抗原建立了检测H1亚型SIV抗体的间接ELISA方法。该ELISA方法具有较高的特异性和敏感性,重复性好。应用该方法对2006年5～12月共计2029份临床猪血清进行检测,结果显示各个地区存在不同程度的SIV感染,平均阳性率为23.46％。在6月、7月和12月分别出现抗体水平高峰,分别高达25.35％、24.92％和51.42％。
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