【摘 要】
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本研究运用RT-PCR及RACE技术首次从中华蜜蜂中分离得到P450家族的一个基因,与意大利蜜蜂中P450家族的336A1基因有较高同源性,命名为Acc336A1。该基因的开放阅读框(ORF)包含1491
【机 构】
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山东农业大学生命科学学院,山东泰安,271018山东农业大学动物科技学院,山东泰安,271018
【出 处】
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华东六省一市生物化学与分子生物学学会2014年学术交流大会暨浙江省第十一届学会会员代表大会
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本研究运用RT-PCR及RACE技术首次从中华蜜蜂中分离得到P450家族的一个基因,与意大利蜜蜂中P450家族的336A1基因有较高同源性,命名为Acc336A1。该基因的开放阅读框(ORF)包含1491个核苷酸,编码一个有497个氨基酸,分子量大约为56.95kDa,等电点为8.8的蛋白。分别用不同农药(蚊蝇醚、百草枯)、重金属(氯化汞)及紫外线处理蜜蜂,然后采用定量PCR和Western-blot技术动态检测Acc336A1在mRNA和蛋白水平上的表达模式,通过免疫组化的方法对蜜蜂Acc336A1蛋白进行组织定位分析,为进一步研究细胞色素解毒功能奠定基础。
定量PCR结果显示,Acc336A1基因对紫外线,蚊蝇醚、百草枯和氯化汞均有较明显反应,在处理一段时间后基因的表达量呈现先上升后又略微下降的趋势,并且一直高于对照组,整体是呈现上调表达。表面中华蜜蜂Acc336A1参与对于紫外线、农药、重金属等不良环境的抵御作用。免疫组织化学结果显示,Acc336A1广泛的分布在气孔、体壁表层及眼部周围组织;然而在眼内部却几乎没有Acc336A1的存在。此外,Acc336A1大量印染着腹部表层细胞,胸部背板组织也是Acc336A1分布的主要区域。这些结果表明,Acc336A1主要在中华蜜蜂的表皮部位发挥其解毒作用。
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