水牛胎儿成纤维细胞系的建立及生物学特性的研究

来源 :中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zane35
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  成纤维细胞(fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分之一,由胚胎时期的间充质细胞分化而来,是动物有机体中分步最广的一类细胞。建立水牛的成纤维细胞系,一方面,可以在细胞水平上保存该物种的全基因组信息以及研究细胞生理活动背后的分子机理;另一方面,为研究转基因水牛、克隆水牛提供稳定、可靠的供体细胞。本研究以从屠宰场收集的2~3月龄水牛胎儿耳部、皮肤、肾脏为材料,采用组织块培养法分离得到上述三个部位的成纤维细胞,并对其进行了一系列生物学特性的研究:生长曲线均为典型"S"型;微生物检测均为阴性;同工酶条带清晰,未发现与其他细胞交叉污染;经小鼠抗波形蛋白、小鼠抗角蛋白免疫组化鉴定,上述细胞均为成纤维细胞;取上述细胞第20代进行核型分型,染色体均为48条,2倍体细胞比率均在90%以上;对上述分别转染了绿色荧光蛋白(EGFP)和红色荧光蛋白(RedFP),在转染72h后,转染效率均可以达到20%以上。以上结果表明,采用组织块培养法可以从水牛胎儿耳部、皮肤、肾脏分离得到性质稳定成纤维细胞,并建立细胞系。
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