海兔素阻断EGFR受体通路抑制乳腺癌细胞增殖并诱导凋亡作用研究

来源 :中国细胞生物学学会全体会员代表大会暨第十二次学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yangyugui888
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  海兔素(Aplysin)由本实验室从三列凹顶藻Larencia tristicha中提取纯化,并经IR、13C-NMR,1H-NMR鉴定为溴代倍半萜.目的:研究海兔素对人乳腺癌SK-BR-3细胞的毒性作用及可能机制.方法:采用CCK-8法测定不同剂量海兔素(0、10、20、30、40、45、50、55、60 μg/ml)作用24 h对SK-BR-3细胞增殖的影响;流式细胞仪FITC-Annexin V/PI双染法测定细胞凋亡;Western blot分析法测定EGFR,Akt以及ERK总蛋白和磷酸化蛋白的表达.结果:1.经20、30、40、45μg/ml海兔素处理细胞24h后,SK-BR-3细胞的生长增殖明显受到抑制,呈剂量依赖性.药物对SK-BR-3的IC25和IC50值为分别为29.4 μg/ml和33.7 μg/ml.2.SK-BR-3细胞经IC25和IC5o剂量的海兔素处理24 h后,经FITC-Annexin V/PI双染和经流式细胞仪检测,分析得到明显的凋亡细胞(包括早期和中晚期凋亡细胞),细胞凋亡率分别是(16.7±1.4)%和(58.3±2.4)%,明显高于正常对照组(0±1.2)%,p<0.O1..3与正常对照组比较,IC25和IC50剂量的海兔素处理SK-BR-3细胞24h后,EGFR、ERK和Akt蛋白的磷酸化水平明显下降,其表达水平随药物作用浓度增大而减弱,但其总蛋白表达水平不受药理作用影响.结论:海兔素可抑制SK-BR-3细胞增殖并诱导凋亡,其作用机制与阻断EGFR/Akt和EGRF/ERK信号通路有关.
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