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为克隆和表达编码微小隐孢子虫(Cryptosporidium parvum)卵囊壁蛋白CP41基因．以本室繁殖保存的微小隐孢子虫鼠基因型卵囊提取总RNA作为模板，RT-PCR扩增CP41基因，克隆到pMD 18-T并进行序列测定，与GenBank下载的序列进行同源性比对。将鉴定正确的序列亚克隆到pGEX-5x-3原核表达载体，构建重组质粒pGEX-5x-3-CP41，转化BL21(DE3)感受态细胞，经异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达并复性纯化包涵体蛋白。用十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测目的蛋白，蛋白质印迹(Western blotting)分析该重组蛋白的免疫活性。结果显示，克隆的目的基因核苷酸序列与GenBank登录的序列比较，同源性为90.50％。氨基酸序列同源性为87.57％。重组质粒转化菌在IPTG诱导下高效表达，表达产物大小约为46ku，Westernblotting分析显示，纯化复性后的重组蛋白可被辣根过氧化物酶标记的抗谷胱甘肽巯基转移酶单克隆抗体(Mouse ant-GST)、微小隐孢子虫感染兔血清特异性识别。ELISA检测结果表明，该蛋白免疫的兔血清特异性抗体达到较高水平，表明表达的重组蛋白具有较好的免疫原性和免疫反应性。