【摘 要】
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采用农杆菌介导法,将Cryt3A基因转入已转Cry1Ac基因的优良品种741株系pB29中,获得抗性稳定的转双Bt基因株系.对获得的转双Bt基因741杨株系进行PCR检测表明,Cry1Ac基因稳
【出 处】
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中国林学会林木遗传育种分会第七届全国林木遗传育种学术大会
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采用农杆菌介导法,将Cryt3A基因转入已转Cry1Ac基因的优良品种741株系pB29中,获得抗性稳定的转双Bt基因株系.对获得的转双Bt基因741杨株系进行PCR检测表明,Cry1Ac基因稳定存在于pB29株系中,Cry3A基因已整合到各株系的基因组DNA中.通过荧光定量PCR在转录水平对外源基因的表达进行检测,8个转双Bt株系均检测到了Cry1Ac和Cry3Aa基因的荧光扩增信号；Cry1Ac基因的转录丰度在3.26×104～7.50× 105之间；Cry3A基因的转录丰度在1.79×108～6.05×109之间.Cry3A基因的转录丰度极显著高于Cry1Ac的转录丰度.ELISA检测表明,双Bt株系能同时表达两种Bt毒蛋白,Cry3A蛋白表达量显著高于Cry1Ac蛋白表达量.用转基因株系新鲜叶片室内饲喂柳蓝叶甲Plagiodera versicolora和美国白蛾Hyphantria cunea表明,转双Bt基因741杨对鳞翅目和鞘翅目害虫兼具抗性.8个转双Bt基因株系表现出了高中低的抗性水平,其中5个高抗柳蓝叶甲株系的抗性水平明显高于转单Bt基因(Cry3A)的3个高抗株系；在对美国白蛾的抗性上,只有1个株系对美国白蛾表现出了极低的抗性,另外7个株系与含有Cry1Ac+API基因的株系表现一致.
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