【摘 要】
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目的探究氟尿嘧啶(5-FU)对结直肠癌RKO细胞SHP2基因表达的影响。方法培养对数生长期的人结直肠癌细胞RKO,5-FU处理48 h后,采用免疫荧光和Western免疫印迹观察SHP2的蛋白表达
【机 构】
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第二军医大学药学院生化药学教研室,华东理工大学生物工程学院,第二军医大学热带医学与公共卫生学系环境卫生教研室
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(30500093,81274162);国家科技部“重大新药创制”专项(2009ZX09103-690);上海市科委生物医药领域科技支撑项目(16431904400);上海市教委科研创新项目(14ZZ077)
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目的探究氟尿嘧啶(5-FU)对结直肠癌RKO细胞SHP2基因表达的影响。方法培养对数生长期的人结直肠癌细胞RKO,5-FU处理48 h后,采用免疫荧光和Western免疫印迹观察SHP2的蛋白表达水平;将能够特异性抑制SHP2表达的siRNA(si SHP2)转染RKO细胞,5-FU处理48 h,CCK8测定细胞吸光度(A)值,流式检测细胞凋亡,观察RKO对5-FU的敏感性变化及5-FU诱导细胞凋亡的影响。结果结直肠癌细胞RKO在5-FU处理48 h后,其细胞核中SHP2的蛋白表达水平明显增高;si SHP2转染后,RKO细胞对5-FU的敏感性降低,且降低了5-FU诱导的细胞凋亡率。结论 5-FU可能通过影响SHP2的表达,促进RKO细胞的凋亡,发挥抑癌作用。
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