【摘 要】
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目的 探讨量子点(QDs)标记脂肪干细胞(ADSCs)并用于活体内示踪的可行性.方法 从SD大鼠的脂肪组织中以0.1％Ⅰ型胶原酶消化提取脂肪干细胞,含10％胎牛血清的DMEM/F-12培养基培养,倒置显微镜下观察各代细胞形态;噻唑蓝(MTT)法绘制生长曲线;流式细胞仪鉴定表面分子的表达;使用成脂、成骨定向诱导液诱导分化,并以油红O、茜素红染色鉴定.QDs标记细胞,评估不同浓度QDs对细胞增殖的影响
【机 构】
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目的 探讨量子点(QDs)标记脂肪干细胞(ADSCs)并用于活体内示踪的可行性.方法 从SD大鼠的脂肪组织中以0.1％Ⅰ型胶原酶消化提取脂肪干细胞,含10％胎牛血清的DMEM/F-12培养基培养,倒置显微镜下观察各代细胞形态;噻唑蓝(MTT)法绘制生长曲线;流式细胞仪鉴定表面分子的表达;使用成脂、成骨定向诱导液诱导分化,并以油红O、茜素红染色鉴定.QDs标记细胞,评估不同浓度QDs对细胞增殖的影响,小动物活体成像系统检测移植的标记细胞.结果 原代ADSCs经24 h培养大多数细胞贴壁呈梭形和三角形,CD44、CD90阳性表达,CD31、CD34、CD45阴性表达,能定向诱导为脂肪细胞、成骨细胞.QDs标记的ADSCs在倒置荧光显微镜下可见胞质中呈现明亮的红色荧光,标记后10d仍能检测到较强的荧光信号且细胞生长良好.活体成像系统能检测到经门静脉移植的ADSCs.结论 脂肪干细胞易于分离和培养,并迅速扩增,生物学特性稳定;在体外可诱导分化为脂肪细胞和成骨细胞.QDs标记ADSCs用于移植干细胞示踪是可行的,荧光稳定且信号强,组织穿透性强、标记效率高。
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