【摘 要】
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目的 探讨下调survivin基因对卵巢癌顺铂（DDP）耐药细胞株SKOV3/DDP细胞生长、凋亡及药物敏感性的影响。方法 构建survivin基因的小干扰RNA（siRNA）表达载体pSilencer-survivin，用脂质体方法转染SKOV3/DDP细胞株，另设未转染组和转染pSilencer-control组作为对照。显微镜下观察转染前后细胞的变化，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和We
【机 构】
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煤炭总医院妇产科,北京100028,中国医学科学院肿瘤研究所肿瘤医院妇瘤科,中国医学科学院细胞生物学与分子生物学研究室,中国医学科学院肿瘤研究所肿瘤医院妇瘤科,中国医学科学院细胞生物学与分子生物学研究
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目的 探讨下调survivin基因对卵巢癌顺铂（DDP）耐药细胞株SKOV3/DDP细胞生长、凋亡及药物敏感性的影响。方法 构建survivin基因的小干扰RNA（siRNA）表达载体pSilencer-survivin，用脂质体方法转染SKOV3/DDP细胞株，另设未转染组和转染pSilencer-control组作为对照。显微镜下观察转染前后细胞的变化，逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot分别检测survivin mRNA及蛋白的表达，二苯基溴化四氮唑蓝（MTT）法检测细胞生长情况，流式细胞仪检测细胞凋亡及周期的变化。各组细胞加入DDP，检测其对DDP药物敏感性的影响。结果 survivin siRNA可明显下调SKOV3/DDP细胞中survivin mRNA及蛋白表达水平。SKOV3/DDP细胞生长受到明显抑制，生长曲线低平。转染48h后，转染pSilencer-survivin组细胞凋亡率为19.1%，明显高于未转染组（2.6%）和转染pSilencer-control组（3.5%），G1/G0期细胞所占的比例增高，而G2/M期细胞所占的比例降低。转染pSilencer-survivin组细胞的IC50明显降低，为1.16μg/ml。结论 survivin siRNA可下调SKOV3/DDP细胞中survivin的表达，使细胞生长减慢，凋亡增加，对DDP的药物敏感性增强。
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