大豆fad基因反义表达载体构建及转化烟草研究

来源 :广西植物 | 被引量 : 0次 | 上传用户：icanfly316

【摘要】

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使用PCR方法从大豆基因组DNA中扩增出大豆油酸脱饱和酶基因fad2-1,连接到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌JM109菌株。测序后,用DNAstar软件进行同源性比对。然后将正确的序列反向

【作者】

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田苗苗刘艳菊李敏周延清姚换灵邢延豪

【机构】

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河南师范大学生命科学学院

【出处】

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广西植物

【发表日期】

：

2011年1期

【关键词】

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大豆反义油酸脱饱和酶基因根癌农杆菌烟草遗传 Glycine max antisense oleic acid aesaturase gene Agrob

【基金项目】

：

国家“863”项目（2006AA100104-15）, 河南省自然科学基础研究项目（2008A208018）

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使用PCR方法从大豆基因组DNA中扩增出大豆油酸脱饱和酶基因fad2-1,连接到pMD18-T载体中,转化大肠杆菌JM109菌株。测序后,用DNAstar软件进行同源性比对。然后将正确的序列反向克隆到表达载体pBt,并转化农杆菌菌株LBA4404,经双酶切鉴定和PCR扩增检测,获得具有该基因反向序列的农杆菌工程菌,转化烟草无菌苗叶片外植体,经过组织培养和卡那霉素抗性筛选,获得抗性烟草转化植株共75株,PCR扩增出npt-II基因,RT-PCR检测到大豆反义油酸脱饱和酶基因转录产物和GC-MS测定其油酸含量

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