【摘 要】
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利用RT-PCR方法扩增了禽脑脊髓炎病毒VP0、VP3和VP1基因,分别插入pGEX-4T-1原核表达载体,转化到E.coli ER2566表达菌内,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析表达产物.结果表明,表
【机 构】
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内蒙古农业大学,内蒙古自治区兽医站,农业部兽医诊断中心,吉林农业大学
【基金项目】
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农业部禽脑脊髓炎诊断技术资助项目
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利用RT-PCR方法扩增了禽脑脊髓炎病毒VP0、VP3和VP1基因,分别插入pGEX-4T-1原核表达载体,转化到E.coli ER2566表达菌内,经IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析表达产物.结果表明,表达的VP0、VP3、VP1融合蛋白分子量分别为53,53,56ku.以电洗脱法纯化VP0、VP3、VP1表达蛋白抗原并分别建立了间接ELISA方法,用阳性血清和阴性血清进行检测.结果显示,表达VP1蛋白反应活性相对高于VP0、VP3蛋白反应活性,最后再将自制VP1板用自配试剂检测其活性,同时用美
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