【摘 要】
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目的:获得原核表达的中国版纳猪SIAI类P1蛋白质分子.方法:PCR扩增去信号肽的SIAl类P1 cDNA序列,亚克隆至pCEMT载体,测序.将亚克隆的P1 cDNA片段插入表达载体pET42b(+),构建重
【机 构】
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上海第二医科大学上海市免疫学研究所
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目的:获得原核表达的中国版纳猪SIAI类P1蛋白质分子.方法:PCR扩增去信号肽的SIAl类P1 cDNA序列,亚克隆至pCEMT载体,测序.将亚克隆的P1 cDNA片段插入表达载体pET42b(+),构建重组表达质粒pET-42b(+)/sla-p1,转化E-coli表达菌BL21-CodonPlus(DE3)-RIL,IFIG诱导P1-8×his融合蛋白表达,经包涵体洗涤,8mol/L尿素变性溶解,Ni2+亲和层析,梯度透析后,定量保存.SDS-PAGE、western-blotting鉴定
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