蜂毒肽前体蛋白cDNA的克隆及序列分析

来源 :大连理工大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：jiacktalk

【摘要】

：

从蜜蜂(Apis mellifera)毒腺中提取总RNA,通过RT-PCR方法扩增得到了蜂毒肽前体蛋白(promelittin)的cDNA. 扩增产物克隆到pT7Blu-T载体,再进一步将插入片段酶切连接到pUC118载

【作者】

：

李大力王关林方宏筠

【机构】

：

大连理工大学,化工学院,辽宁,大连,116012辽宁师范大学,生物工程研究所,辽宁,大连,116029;

【出处】

：

大连理工大学学报

【发表日期】

：

2000年2期

【关键词】

：

肽脱氧核糖核酸无性系

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从蜜蜂(Apis mellifera)毒腺中提取总RNA,通过RT-PCR方法扩增得到了蜂毒肽前体蛋白(promelittin)的cDNA. 扩增产物克隆到pT7Blu-T载体,再进一步将插入片段酶切连接到pUC118载体上,构建了与β-半乳糖苷酶部分序列相融合的蜂毒肽前体蛋白表达载体并转化大肠杆菌JM109. 转化的大肠杆菌在含IPTG的LB培养基中生长正常. 序列分析结果表明,克隆得到的cDNA序列与已发表序列完全相同且与β-半乳糖苷酶部分序列构成了正确的读码框.

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