【摘 要】
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目的:利用体外细胞分子生物学实验探讨芪参益气滴丸联合骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死后小鼠血管生成及心功能的影响.方法:采用C57BL/6J的雄性小鼠,将60只小鼠采用数字随机
【机 构】
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广西中医药大学第一附属医院心血管内科二区,广西 南宁 530022;广西中医药大学,广西 南宁 530299
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目的:利用体外细胞分子生物学实验探讨芪参益气滴丸联合骨髓间充质干细胞移植对心肌梗死后小鼠血管生成及心功能的影响.方法:采用C57BL/6J的雄性小鼠,将60只小鼠采用数字随机法分为3组(n=20):心肌梗死组(MI+PBS组)、心肌梗死+间充质干细胞移植组(MI+MSCs组)和心肌梗死+间充质干细胞移植+芪参益气滴丸组(MI+MSCs+QSYQ组).用蒸馏水将芪参益气滴丸制备为3.9 mg/mL浓度的药液,MI+MSCs+QSYQ组按0.1 mL·kg-1·d-1灌胃,MI+PBS组和MI+MSCs组均按等量生理盐水灌胃.各组小鼠经适应性连续喂养14 d后,采用开胸的方式结扎冠状动脉前降支建立MI模型,造模24 h后,从小鼠胫骨或腓骨中分离骨髓间充质干细胞,将骨髓间充质干细胞通过多点心肌内注射的方式注射到小鼠心肌梗死临近区域,心肌梗死组以同样方式注射等量PBS.在显微镜下观察骨髓间充质干细胞移植0 h及3、7、14 d的干细胞形态变化;21 d后应用彩色多普勒超声心动图进行心功能检测;造模完成21 d后,处死小鼠,留取心脏标本,用免疫组化染色和微血管密度的测定观察小鼠血管新生情况.结果:移植干细胞形态生长良好与细胞移植时间成正比,与MI+PBS组比较,MI+MSCs组和MI+MSCs+QSYQ组骨髓间充质干细胞表面的CD90.2和Ly6A呈高表达,CD31和CD117几乎不表达.干细胞移植21 d,MI+MSCs+QSYQ组LVDd、LVSd值明显低于MI+PBS组和MI+MSCs组,同时LVEF、LVFS均明显升高(P<0.05).免疫组化定量分析结果提示MI+MSCs+QSYQ组的血管新生密度较其余两组明显增多,组间差异具有统计学意义(P<0.05).结论:芪参益气滴丸联合骨髓间充质干细胞移植不仅能促进心肌梗死小鼠血管新生,而且对改善心功能具有积极作用.
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