探讨盐霉素在体外对肾上腺皮质癌SW13细胞的增殖、周期、凋亡、侵袭的影响及其作用机制。
方法以浓度为30.000、20.000、10.000、5.000、2.500、1.250、0.625、0 μmol/L的盐霉素处理SW13细胞,分别在24、48、72、96 h时用细胞计数试剂盒(CCK-8)检测其对增殖的影响并计算半数抑制浓度(IC50)。流式细胞仪检测盐霉素处理后SW13细胞的周期及凋亡。Transwell侵袭实验检测盐霉素对SW13细胞侵袭力的影响。Western blot检测β-连环蛋白(β-catenin)与B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)蛋白的表达。
结果CCK-8结果显示0~30 μmol/L的盐霉素对SW13细胞的抑制呈明显的时间-计量依赖效应,24、48、72、96 h对应的IC50依次为25.65、7.97、2.89、0.40 μmol/L。流式细胞检测结果显示,盐霉素处理SW13细胞后处于G1期的细胞百分比分别为(66.250±1.162)%、(71.693±0.849)%,与对照组[(59.837±3.043)%]比较差异有统计学意义(P=0.027、P=0.003);凋亡率分别为9.9%、30.3%、3.4%,差异有统计学意义(P=0.000)。Transwell结果显示对照组与实验组细胞侵袭数分别为(66.800±5.263)、(30.400±2.881)、(17.600±3.050)个,差异有统计学意义(P=0.000)。Western blot结果显示Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白β-catenin及抑制凋亡相关蛋白bcl-2表达下调。
结论盐霉素在体外可抑制肾上腺皮质癌SW13细胞的增殖,阻滞其G1/S期,减弱侵袭力并诱导凋亡,其机制可能与干扰Wnt/β-catenin信号通路及下调凋亡抑制蛋白bcl-2有关。