聚乳酸降解终产物对成骨样细胞增殖和成骨表型影响的体外实验研究

来源 :中国修复重建外科杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:eoast
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目的 探讨聚乳酸(polylactic acid,PLA)降解终产物乳酸对成骨样细胞增殖和成骨表型的影响,为骨组织工程支架材料的设计和降解调控提供理论依据.方法 实验分为A、B、C3组,A、B组分别采用含4、8、16、22、27 mmol/L右旋乳酸(L-lactic acid,L-LA)和外消旋乳酸(D,L-lactic acid,D,L-LA)的培养液培养Ros 17/2.8成骨样细胞,C组以不含乳酸的培养液(pH7.4)培养细胞.培养1、3、5d,采用MTT法检测细胞相对增殖率(relative growthratio,PGR)和细胞毒性评级.另取含4 mmol/L L-LA(A组)及4 mmol/L D,L-LA(B组)的培养液培养Ros 17/2.8成骨样细胞,以不含乳酸的培养液(pH7.4)培养细胞作为空白对照组(C组).培养1、5d时检测相对ALP活性(relative ALP ratio,RAR),21d时采用von Kossa染色法检测细胞矿化结节生成并行定量分析.结果 乳酸浓度为4 mmol/L时,培养5d内A、B组RGR均值均>80%,细胞毒性评级为0级或Ⅰ级,无明显细胞毒性;浓度增大至8 mmol/L和16 mmol/L时,A、B组表现出毒性作用的时间分别为培养5d和3 d;浓度≥22 mmol/L时,A、B组乳酸培养液在培养ld时即对细胞增殖产生明显抑制.相同浓度下,各时间点A组RGR均高于B组,除4 mmol/L浓度培养ld和3d外,差异均有统计学意义(P<0.05).培养1d,A、B组RAR分别为144.1%±3.2%和115.2%±9.8%,5d时分别为129.6%±9.8%和78.2%±6.9%,A组均显著高于B组(P< 0.05).yon Kossa染色示,培养21d,A组黑色团状物明显多于B、C组,定量分析分别为91.2%±8.2%、50.3%±7.9%和54.2%±8.6%,A组显著高于B、C组(P<0.05);B、C组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 PLA降解产物的浓度和组成对成骨样细胞增殖和成骨表型均有显著影响.
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