论文部分内容阅读
目的 探讨聚乳酸(polylactic acid,PLA)降解终产物乳酸对成骨样细胞增殖和成骨表型的影响,为骨组织工程支架材料的设计和降解调控提供理论依据.方法 实验分为A、B、C3组,A、B组分别采用含4、8、16、22、27 mmol/L右旋乳酸(L-lactic acid,L-LA)和外消旋乳酸(D,L-lactic acid,D,L-LA)的培养液培养Ros 17/2.8成骨样细胞,C组以不含乳酸的培养液(pH7.4)培养细胞.培养1、3、5d,采用MTT法检测细胞相对增殖率(relative growthratio,PGR)和细胞毒性评级.另取含4 mmol/L L-LA(A组)及4 mmol/L D,L-LA(B组)的培养液培养Ros 17/2.8成骨样细胞,以不含乳酸的培养液(pH7.4)培养细胞作为空白对照组(C组).培养1、5d时检测相对ALP活性(relative ALP ratio,RAR),21d时采用von Kossa染色法检测细胞矿化结节生成并行定量分析.结果 乳酸浓度为4 mmol/L时,培养5d内A、B组RGR均值均>80%,细胞毒性评级为0级或Ⅰ级,无明显细胞毒性;浓度增大至8 mmol/L和16 mmol/L时,A、B组表现出毒性作用的时间分别为培养5d和3 d;浓度≥22 mmol/L时,A、B组乳酸培养液在培养ld时即对细胞增殖产生明显抑制.相同浓度下,各时间点A组RGR均高于B组,除4 mmol/L浓度培养ld和3d外,差异均有统计学意义(P<0.05).培养1d,A、B组RAR分别为144.1%±3.2%和115.2%±9.8%,5d时分别为129.6%±9.8%和78.2%±6.9%,A组均显著高于B组(P< 0.05).yon Kossa染色示,培养21d,A组黑色团状物明显多于B、C组,定量分析分别为91.2%±8.2%、50.3%±7.9%和54.2%±8.6%,A组显著高于B、C组(P<0.05);B、C组间差异无统计学意义(P>0.05).结论 PLA降解产物的浓度和组成对成骨样细胞增殖和成骨表型均有显著影响.