【摘 要】
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目的 通过比较自身不表达Nurrl基因的人神经母细胞瘤细胞SK―N―SH和过表达外源性Null基因的SK―N―SH/Nurrl细胞对神经毒素6-羟多巴胺(6-OHDA)损伤的敏感程度,探讨Null基因
【机 构】
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首都医科大学宣武医院,北京100053;首都医科大学细胞生物学教研室,北京100054;首都医科大学北京市神经科学研究所北京市神经再生修复研究重点实验室,北京100054;现在首都医科大学附属北京朝阳
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目的 通过比较自身不表达Nurrl基因的人神经母细胞瘤细胞SK―N―SH和过表达外源性Null基因的SK―N―SH/Nurrl细胞对神经毒素6-羟多巴胺(6-OHDA)损伤的敏感程度,探讨Null基因与6一OHDA引起的多巴胺(DA)能神经元特异性损伤的相关性.方法①绘制SK―N―SH细胞及SK―N―SH/Nurrl细胞的生长曲线,比较外源性Null基因过表达对细胞增殖率的影响.②用不同浓度的6-OHDA(5―100μmol·L^-1)分别作用两株细胞1―24h,倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,MTT测定法比较两株细胞的存活率.③用75μmol·L^-1的6-OHDA作用12h,经Hoechst33342染色,荧光显微镜观察细胞核形态,比较两株细胞的凋亡情况.结果①生长曲线结果显示,SK―N―SH/Null细胞增殖数目低于SK―N―SH细胞一②MTT结果显示,6-OHDA对两株细胞的存活均有抑制作用,但SK―N―SH/Null细胞存活率下降更为明显.③Hoechst33342染色结果显示,用75μmol·L^-1的6-OHDA作用12h后SK―N―SH细胞核没有出现明显的凋亡形态改变,而部分SK―N―SH/Null细胞的细胞核出现了染色质凝聚、碎裂等凋亡形态改变,比例约为22％-24％.结论外源性Null基因过表达抑制SK―N―SH细胞增殖,增强SK―N―SH细胞对6-OHDA的敏感性并有可能促进6-OHDA诱导的细胞凋亡.Null基因可能作为易感因子参与多巴胺能神经元的特异性损伤.
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