RAB5A蛋白G81R位点突变对其功能的影响

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【摘要】

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为探讨G81R位点突变对RAB5A蛋白功能的影响,将RAB5A G81R突变体和正常RAB5A反义RNA分别插入pcDNA3.1/V5-His(c) TOPO真核表达载体,并转染到Anip973细胞.用Western blot方法检

【作者】

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宋春娇吕冰洁史忠诚于旸李钰李璞

【机构】

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哈尔滨医科大学遗传学和细胞生物学教研室

【出处】

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遗传学报

【发表日期】

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2003年10期

【关键词】

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反义RNA RAB5A 突变 antisense RNA RAB5A mutation

【基金项目】

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国家自然科学基金，国家自然科学基金，黑龙江省自然科学基金

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为探讨G81R位点突变对RAB5A蛋白功能的影响,将RAB5A G81R突变体和正常RAB5A反义RNA分别插入pcDNA3.1/V5-His(c) TOPO真核表达载体,并转染到Anip973细胞.用Western blot方法检测稳定转染后细胞RAB5A蛋白的表达水平,通过血清饥饿法使Anip973和转染后的细胞同步化,停滞于G0～G1期,再恢复血清培养使细胞从G0～G1期释放,用流式细胞分析仪分析细胞周期各时相细胞百分比.结果显示RAB5A G81R突变体的反义RNA可完全封闭Anip973细胞中R

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