【摘 要】
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目的研究同源异型盒基因B7(HOXB7)介导Wnt/β-Catenin信号通路在结直肠癌侵袭转移中的作用与机制。方法构建慢病毒转染重组体质粒HOXB7/psin,包装质粒PIK和阴性对照质粒psin,
【机 构】
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陕西中医药大学附属医院肿瘤科,咸阳市中心医院肝胆外科,陕西中医药大学附属医院放疗科,陕西中医药大学附属医院耳鼻喉科,
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目的研究同源异型盒基因B7(HOXB7)介导Wnt/β-Catenin信号通路在结直肠癌侵袭转移中的作用与机制。方法构建慢病毒转染重组体质粒HOXB7/psin,包装质粒PIK和阴性对照质粒psin,通过转染技术获得稳定过表达HOXB7的结直肠癌细胞株(SW480/HOXB7,293FT/HOXB7)及对照细胞株(SW480/vector,293FT/Vector)。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)和Western blot法检测HOXB7 mRNA和蛋白的表达,采用免疫荧光染色技术评估HOXB7对结直肠癌细胞株β-Catenin的调控作用,采用qRT-PCR和Western blot法检测Wnt信号通路下游靶基因及蛋白的表达,采用小室试验评价各组细胞转移侵袭能力。结果 SW480/HOXB7,293FT/HOXB7细胞株的HOXB7 mRNA和蛋白表达水平较SW480/vector,293FT/Vector细胞株显著提高(P均<0.05)。HOXB7过表达后,细胞核中β-Catenin表达水平显著升高,并可见明显的入核现象,而在细胞浆中β-Catenin表达水平无明显变化。随着HOXB7的过表达,293FT、SW480细胞株中DKK1、cyclin D1、LEF1等Wnt信号通路下游基因及蛋白的表达均出现不同程度的上调现象。SW480/HOXB7细胞株穿过滤膜的细胞数显著高于SW480/vector细胞株(P<0.05)。结论 HOXB7介导Wnt/β-Catenin信号通路的激活能够通过调控下游基因,提高结直肠癌细胞侵袭能力,增加肿瘤转移的风险。
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