【摘 要】
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目的 观察雄激素受体反应元件陷阱核酸(ARE decoy DNA)在LNCaP细胞中的致凋亡作用及下游信号通路.方法 根据ARE-Ⅰ、ARE-Ⅱ人工合成decoy核酸,进行部分和完全硫代修饰,应用凝
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目的 观察雄激素受体反应元件陷阱核酸(ARE decoy DNA)在LNCaP细胞中的致凋亡作用及下游信号通路.方法 根据ARE-Ⅰ、ARE-Ⅱ人工合成decoy核酸,进行部分和完全硫代修饰,应用凝胶阻抑分析方法检测4种decoy核酸与雄激素受体(AR)特异性结合.选择特异性结合最强decoy核酸通过LipofectinTM 2000转染细胞,MTS法检测转染后细胞增殖能力,共聚焦显微镜观察细胞形态学改变,Western blot检测细胞内蛋白表达.结果 ARE-Ⅱdecoy转染后MTS检测细胞A值0.500±0.013(48 h),与对照decoy转染组0.750±0.055(48 h)比较差异有统计学意义(P＜0.01).细胞核皱缩,核染色质分块,DNA电泳出现阶梯状ladder,证明细胞发生凋亡.Western blot检测发现细胞内p-Akt表达明显降低(P＜0.05),Akt信号通路被抑制,促进了细胞凋亡.结论 ARE-Ⅱdecoy核酸明显抑制前列腺癌LNCaP细胞生长,促进细胞凋亡,改变细胞内信号通路.
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