【摘 要】
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目的 研究脂质体介导下pcDNA3.1/BDNF基因转染对缺糖、缺氧-再给氧损伤神经细胞的保护作用.方法 建立缺糖、缺氧-再给氧损伤SH-SY5Y神经细胞模型,应用显微镜观察细胞形态、MT
【机 构】
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解放军第309医院麻醉科,解放军309医院神经内科,解放军总医院麻醉科,军事医学科学院毒物药物研究所
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目的 研究脂质体介导下pcDNA3.1/BDNF基因转染对缺糖、缺氧-再给氧损伤神经细胞的保护作用.方法 建立缺糖、缺氧-再给氧损伤SH-SY5Y神经细胞模型,应用显微镜观察细胞形态、MTT比色法测定细胞存活率、苔盼蓝染色排斥试验检测细胞活力、测定SH-SY5Y细胞 LDH 释放率、Annexin V-FITC和Propidium Iodide双染色法荧光显微镜下观察细胞凋亡以及流式细胞仪检测细胞死亡和凋亡等方法,观察应用基因转染方法导入表达BDNF的基因片段(pcDNA3.1/BDNF)对缺糖、缺氧-再给氧损伤神经细胞的保护作用.结果 显微镜下观察到,在转染了表达BDNF基因的SH-SY5Y细胞中,经ATRA诱导后,即使实施了缺糖、缺氧-再给氧处理,其死亡、凋亡的细胞数和对照组相比明显减少,且细胞的形态改善显著;在细胞存活率、死亡率、LDH 释放率的测定结果中,基因转染组和对照组相比,显著提高了细胞的存活率,降低细胞死亡率和LDH 释放率(P＜0.05);在Annexin V-FITC和Propidium Iodide双染色法荧光显微镜观察及流式细胞仪的检测中,转染了表达BDNF基因的SH-SY5Y细胞,经ATRA诱导后,其保护作用最好,和正常对照组比较,死亡、凋亡的细胞数显著减少.结论 应用基因转染方法导入表达BDNF的基因片段对缺糖、缺氧-再给氧损伤神经细胞具有保护作用.
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