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目的 通过3-甲基腺嘌呤(3-MA)干预,探讨邻苯二甲酸单丁酯(mono-butyl phthalate,MBP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(mono-ethylhexyl phthalate,MEHP)联合染毒诱导小鼠睾丸间质细胞(TM-3细胞)自噬与凋亡之间的关系.方法 取处于对数生长期TM-3细胞,设置MBP+MEHP(终浓度均分别为0、50、100、200、400、800 μmol/L)染毒组或者3-MA染毒组(终浓度分别为0、0.25、0.5、1、1.25、2.5、5 mmol/L);以及MBP+MEHP染毒组(终浓度均为400 μmol/L)、3-MA干预组[1 mmol/L 3-MA干预1h后,再加入MBP+MEHP(终浓度均为400 μmol/L)联合染毒液],培养24h,采用CCK-8法检测细胞存活率.采用MDC免疫荧光法检测细胞自噬囊泡的诱导情况;采用Annexin V-FITC/PI法检测细胞早期凋亡率;采用Western blot法检测细胞自噬相关蛋白LC3、p62表达水平和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达水平.结果 与对照组相比,50 μmol/L的MBP+MEHP染毒组TM-3细胞的存活率升高,而100、200、400、800 μmol/L的MBP+MEHP染毒组TM-3细胞的存活率均下降,差异均有统计学意义(P＜0.05);且随着MBP+MEHP染毒剂量的增高,TM-3细胞的存活率呈先上升后下降的趋势.与对照组相比,0.25、0.5 mmol/L 3-MA染毒组TM-3细胞的存活率均较高,而1.25、2.5、5 mmol/L 3-MA染毒组TM-3细胞的存活率均较低,差异均有统计学意义(P＜0.05);;仅1 mmol/L 3-MA染毒组TM-3细胞的存活率.且随着3-MA染毒剂量的增高,TM-3细胞的存活率呈先上升后下降的趋势.TM-3细胞的存活率依次为对照组＞MBP+MEHP染毒组＞3-MA干预组,差异均有统计学意义(P＜0.05).免疫荧光结果显示,荧光信号强度依次为对照组＜3-MA干预组＜MBP+MEHP染毒组.TM-3细胞的早期凋亡率依次为对照组＜MBP+MEHP染毒组＜3-MA干预组,差异均有统计学意义(P＜0.05).自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达水平为对照组＜3-MA干预组＜MBP+MEHP染毒组,p62蛋白表达水平为对照组＞3-MA干预组＞MBP+MEHP染毒组;凋亡相关蛋白Bax表达水平为对照组＜MBP+MEHP染毒组＜3-MA干预组,Bcl-2表达情况为对照组＞MBP+MEHP染毒组＞3-MA干预组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 在本实验浓度下,MBP+MEHP染毒可提高TM-3细胞自噬和凋亡水平;3-MA抑制TM-3细胞自噬水平后,MBP+MEHP染毒提高细胞凋亡水平,说明自噬作为一种保护因素可抑制细胞凋亡.