猪生长激素cDNA克隆及在大肠杆菌中的表达

来源 :华中农业大学学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wenty2008
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用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从猪脑垂体总RNA中扩增出编码猪生长激素(GH)成熟肽基因序列,定向克隆至质粒pUC18。序列分析表明,克隆的猪GH cDNA长573bp,不含信号肽序列,并在该序列之前加入一起始密码子ATG。将猪GH cDNA定向克隆至原核表达载体pBV220,构建成重组猪GH基因表达载体pBVpGH7。SDS-PAGE和薄层扫描分析表明:经42℃诱导,pBVpGH7在大肠杆菌中可表达一分子量约22000的特异蛋白,表达量约占细胞总蛋白的20.5%。
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