一种酶反应器筛选胰蛋白酶抑制剂方法的建立

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目的 建立从黄酮化合物库中筛选胰蛋白酶抑制剂的新方法.方法 利用毛细管固定化酶反应器技术,通过环氧基的开环反应,将胰蛋白酶与poly (GMA-co-PEGDA)有机聚合物整体材料共价键合制备毛细管固定化胰蛋白酶反应器;对酶反应浓度与反应时间等参数进行了系统研究,利用荧光显微镜、扫描电子显微镜和拉曼光谱对酶反应器进行了表征;采用微径液相色谱法对酶反应器的活性和动力学参数进行了系统评价;将制备的酶反应器用于20种中药黄酮化合物中胰蛋白酶抑制剂的筛选;通过分子对接手段进一步考察胰酶与抑制剂之间的作用机制.结果 16种黄酮化合物具有不同程度的胰蛋白酶抑制作用,其中,漆黄素的抑制效果最佳,抑制率为(62.9±1.2)%,分子对接结果进一步说明了漆黄素与胰蛋白酶之间的作用机制.结论 建立了一种简单、有效的胰蛋白酶抑制剂的筛选方法,可进一步推广应用.
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