【摘 要】
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[目的]克隆五指山小型猪生长激素释放激素(GHRH)受体基因的cDNA,并对其进行序列分析.[方法]以五指山小型猪耳组织提取的基因组RNA为模板,根据已报道的猪GHRHR cDNA序列设计3
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[目的]克隆五指山小型猪生长激素释放激素(GHRH)受体基因的cDNA,并对其进行序列分析.[方法]以五指山小型猪耳组织提取的基因组RNA为模板,根据已报道的猪GHRHR cDNA序列设计3对引物,用RT-PCR方法进行cDNA扩增.PCR产物经回收纯化后,与pMD18-T连接并转化大肠杆菌DH5 α,转化产物经PCR和双酶切鉴定后筛选出阳性克隆,阳性克隆经LB液体培养基培养鉴定后测序.[结果]成功获得了五指山小型猪GHRH受体基因的cDNA,该片段长1 577 bp,编码423个氨基酸.BLAST分析结果表明,该片段与猪GHRH受体基因仅有23个碱基的差异,同源性为98%;而两者GHRH受体基因均由423个氨基酸组成,序列同源性为96%.[结论]该研究为进一步揭示五指山小型猪的矮小机理提供了理论依据.
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