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目的
观察胆道恶性肿瘤(BTC)中单胺氧化酶-A(MAO-A)对肿瘤相关巨噬细胞免疫功能的影响。
方法在人BTC细胞株中分别瞬时转染MAO-A表达质粒及空白质粒;分离正常人外周血单个核细胞(PBMC),体外诱导分化为巨噬细胞,分别与前述各组转染质粒的BTC细胞株共培养48 h,采用Western blot及酶联免疫吸附试验(ELISA)法分别检测巨噬细胞表达免疫效应蛋白及分泌细胞因子的变化;以重组人干扰素-γ刺激上述各组共培养巨噬细胞24 h,再分别与同组BTC细胞株共培养48 h,流式细胞仪检测各组肿瘤细胞坏死与凋亡。
结果MAO-A在人BTC细胞株中表达下调;与BTC细胞共培养可诱导巨噬细胞分化为M2型肿瘤相关巨噬细胞(TAM),分泌免疫抑制细胞因子白细胞介素(IL)-10及表达程序性死亡配体1(PD-L1),抑制促炎因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-1β、IL-12p70的分泌(分别为18.8±2.3比31.7±1.9、75.0±0.4比150.2± 17.0、49.1±15.2比135.2±1.0,P< 0.05)及抗原提呈分子人类白细胞抗原DR基因(HLA-DR)的表达;在BTC细胞株中上调MAO-A的表达可产生与上述相反的免疫诱导作用,诱导分化为M1型TAM;过表达MAO-A组共培养巨噬细胞可有效地诱导肿瘤坏死与凋亡[(84.85±5.66)%比(1.56 ±0.46)%、(76.73±6.31)%比(1.28±0.57)%,P< 0.05]。
结论BTC中MAO-A表达下调可诱导M2型TAM;MAO-A的重新表达可产生与上述相反的抗肿瘤免疫激活作用。