探讨双平台流式细胞术(FCM)检测正常人群淋巴细胞亚群八项指标绝对计数的生物学变异。
方法2013年9月在北京协和医院募集20名健康志愿者,于研究的第1天、第3天及第5天的上午8:00、中午12:00及下午16:00采集志愿者静脉血,进行双平台流式细胞术淋巴细胞亚群八项指标绝对计数的检测。采用标准化的分析前处理流程,使用规范校准的血液分析仪和流式细胞仪进行检测,研究期间均使用同一批号试剂进行样本的前处理和检测。采用SPSS 13.0软件中的巢式方差分析计算八项指标百分含量和绝对计数的个体内变异、个体间变异,采用Excel 2003计算分析变异、个体指数和参考变化值。各指标的日内和日间差异采用One-Way ANOVA检验及方差分析进行比较,两组间的比较采用独立样本t检验。
结果T细胞(CD3+)、辅助性T细胞(CD3+CD4+CD8-)、抑制性T细胞(CD3+CD4-CD8+)、B细胞(CD3-CD19+)百分含量的个体内变异和个体间变异与文献报道相近,各指标的个体内变异分别为0.03、0.06、0.05、0.14,个体间变异分别为0.12、0.16、0.23、0.31。以上4项指标百分含量的个体指数和95%的参考变化值与文献差异较大,个体指数分别为0.26、0.40、0.22、0.44,95%的参考变化值分别为8.77、16.86、14.93、39.69。所研究的淋巴细胞亚群八项指标绝对计数的个体内变异、个体间变异及分析变异均比其相应的百分含量变异大。含量低的三类细胞亚群(CD3+CD4-CD8-、CD3+CD4+CD8+、CD3+CD16+CD56+)的个体内变异、个体间变异及分析变异相对较大,其中CD3+CD4-CD8-的个体内变异、个体间变异及分析变异分别为0.12、0.49、0.16,CD3+CD4+CD8+的分别为0.40、0.93、0.55,CD3+CD16+CD56+的分别为0.28、1.11、0.16。
结论通过研究淋巴细胞亚群绝对计数的个体内变异、个体间变异及分析变异可以计算个体指数和参考变化值,从而能够确定相应指标参考区间的实用性和判断连续检测结果之间的差异是否有显著性。(中华检验医学杂志,2016, 39:350-355)