表达HBsAg特异性siRNA的重组腺相关病毒载体的构建

来源 :实用肝脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户：wuyuwei1210

【摘要】

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目的构建表达针对HBsAg小发卡RNA（shRNA）的重组腺相关病毒载体,以观察该病毒在体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用。方法将表达针对HBsAg的shRNA定向克隆到pAAV/U6-hrGFP质粒中,获得

【作者】

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胡斌杨燕刘嘉马智勇黄红平余源刘慎沛杨东亮

【机构】

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华中科技大学同济医学院附属同济医院临床免疫研究室,华中科技大学同济医学院实验医学研究中心

【出处】

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实用肝脏病杂志

【发表日期】

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2010年3期

【关键词】

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目的构建表达针对HBsAg小发卡RNA（shRNA）的重组腺相关病毒载体,以观察该病毒在体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用。方法将表达针对HBsAg的shRNA定向克隆到pAAV/U6-hrGFP质粒中,获得重组表达质粒（pAAV-shHBs-hrGFP）;采用磷酸钙转染法将该质粒与包装质粒pAAV-RC和辅助质粒pHelper共同转染AAV293细胞,进行rAAV-shHBs-hrGFP重组病毒包装。收获病毒感染HepG2.215细胞;采用ELISA法检测HBsAg和HBeAg水平。结果酶切鉴定、测

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