蛋白质芯片检测血清铁蛋白条件的优化研究

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目的 优化蛋白芯片检测血清铁蛋白(serum Ferritin,SF)的技术条件.方法 用芯片点样仪将血清铁蛋白的一种杭体点样于高分子三维基片G(PSG)芯片上,用其另一种抗体做为检测杭体,以Cy3标记的羊抗做为二杭进行检测.以双杭夹心原理对SF杭原进行检测.结果 以SF单克隆小鼠抗体为固定探针,选择接触式点样进行芯片点样,点样数在40~200点之间可出现较好的点样一致性;SF的固定探针浓度选择为0.5 mg/ml,其检测杭体的浓度为5 μg/ml;3%小牛血清白蛋白(BSA)和羊抗兔IgG被优选为封闭剂与第二杭体.SF检测下限与生物检测限分别为3.1 ng/ml和4 ng/ml;建立了时SF具有最佳相关系数的标准方程(SF相关系数0.9999)与标准曲线.结论 此研究优化了蛋白芯片检测SF的检测条件,建立了定量检测SF的蛋白芯片平台.
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