论文部分内容阅读
药品分析是保证药品安全有效的重要手段，在药品的研究、生产、流通、使用和监督管理等环节中均有举足轻重的作用，其主要内容包括性状分析、鉴别、检查和含量测定等方面。高效液相色谱仪、气相色谱仪、紫外分光光度计等是制药生产中常用的检测仪器。其中，紫外分光光度计由于准确度高、测定限度低、设备简便、仪器成本低、易于操作等优点，已成为制药生产中必备的检测设备之一，用于药物鉴别、检查和含量测定等。
紫外-可见分光光度法是通过测定物质在紫外-可见光区（200-760nm）产生紫外-可见吸收光谱，根据吸收光谱的特性，对该物质进行定性和定量分析的方法。其理论基础为朗伯-比耳定律，溶液的吸光度和吸光物质含量、液层厚度乘积成正比。对于一般的紫外分光光度法，其测量的相对误差在1%～3%。随着大量心得显色剂的合成及应用，尤其是有关多元络合物和各种表面活性剂的应用研究，推进了元素测定的灵敏度的大幅提高。采用预富集和示差法，适用质量分数从常量（1%～50%）到痕量（10-10～10-8）。紫外-可见分光光度法由紫外分光光度法和可见分光光度法两种方法构成，这两种方法在测定的原理、仪器、操作等方面皆相同。因此，统称为紫外-可见分光光度法，测定仪器一般采用紫外-可见分光光度仪。
在各国药典中，药品的理化常数、鉴别、检查和含量测定等很多项目中，都能见到紫外分光光度法的应用实例。在制药生产中，紫外分光光度法应用最多的是药物含量的测定、药物杂质检测、药物稳定性考察、释放度、药物负载行为测定及物质结构鉴定等方面。
目前利用紫外分光光度计分析的药物品种有维生素、抗生素、解热药、去痛药、降血压药、安定药、镇咳药、滴眼药、磺胺类药、利尿药、某些妇科药、痢疾药、腹泻药、抗肿瘤药、抗结核药等。
1 紫外分光光度法应用于药物含量测定
紫外-可见分光光度法由于灵敏度较高，不仅可用于常量组分的含量测定，也可用于测定微量组分、超微量組分以及多组分混合物同时测定等，在药物分析中主要用于原料药含量测定、制剂含量测定、含量均匀度和溶出度的检查等。
1.1 含量测定的主要依据
朗伯-比耳定律是紫外-可见分光光度法含量测定的依据。朗伯-比耳定律是指单色光辐射穿过被测物质溶液时，在一定的浓度范围内被该物质吸收的量（A）与该物质的浓度（C）和液层的厚度（L）成正比，其关系如下式：
1.2 常用含量测定的方法
测定时，除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用1cm的石英吸收池（紫外光区）或玻璃吸收池（可见光区），以吸收度最大的波长作为测定波长。一般供试品溶液的吸光度读数，以在0.3～0.7的误差最小。
1.2.1 吸收系数法
吸收系数法是利用待测物质的吸收系数与测得的一定浓度时的吸光度比较计算含量的方法，又称绝对法。该法是目前应用最多、最普遍的方法。用本法测定时，吸收系数通常应>100，并注意仪器的校正和检定。
1.2.2 对照品比较法
对照品比较法是采用在相同条件下分别配制供试品溶液和对照品溶液，对照品溶液中所含被测成分的量应为供试品溶液中被测成分规定量的（100±10）%，所用溶剂也应完全一致，在规定的波长处测定供试品溶液和对照品溶液的吸光度后，按下式计算供试品中被测溶液的浓度：
式中，CX为供试品溶液的浓度；AX为供试品溶液的吸光度；CR为对照品溶液的浓度；AR为对照品溶液的吸光度。
1.2.3 标准曲线法
标准曲线法是紫外-可见分光光度法中最经典的方法。测定时，先取与被测物质含有相同组分的标准品，配成一系列浓度不同的标准溶液，在相同条件下，分别测定其吸光度。然后以浓度C为横坐标，以相应的吸光度A为纵坐标，绘制A-C曲线。在相同条件下，测出供试品溶液的吸光度，从标准曲线上便可查出与此吸光度值对应的供试品溶液的浓度。
由于标准曲线对仪器的要求不高，因此是紫外-可见分光光度法中简便易行的方法。
1.2.4 比色法
测定能吸收可见光的有色物质、无色但经显色反应可以生成有色的物质都可以采用本法在适宜的条件下进行测定。比色法通常称为光电比色法，现代的比色分析采用分光光度计进行测定，故又称可见分光光度法。
除另有规定外，比色法所用的空白系指用同体积的溶剂代替，对照品或供试品溶液，然后依次加入等量的相应试剂，并用同样方法处理。在规定的波长处测定对照品和供试品的吸光度后，按对照品比较法计算供试品浓度。如《中国药典》中利血平注射液、硫酸阿托品片等一些药物和制剂的含量采用比色法测定。
1.3 紫外-可见分光光度法对原料药的含量测定
《中国药典》中原料药的含量用百分含量表示。
对照品对照法：含量
式中，CR为对照品溶液的浓度（g/mL）；Ax为供试品溶液的吸光度；AR为对照品溶液的吸光度；m为称取的供试品重量（g）；D为供试品的稀释倍数；V为供试品初次配制的体积（mL）。如奥沙西泮等原料药的含量测定《中国药典》中采用此法。
吸收系数法：含量%=
式中， 为供试品的百分吸收系数；其他符号意义与前面所述意义相同。如对乙酰氨基酚等原料的含量测定《中国药典》中采用此法。
1.4 紫外-可见分光光度法对制剂的含量测定
制剂的含量则用标示量的百分含量表示。
1.4.1 片剂的含量测定
由于片剂含量低，且含辅料，若采用原料药的方法测定含量则有干扰，当片剂中主药在紫外-可见光去有特征吸收光谱，则可采用灵敏度更高的紫外-可见分光光度法测定含量。如盐酸氟奋乃静为有机碱性药物，《中国药典》中原料药采用非水溶液滴定法，而片剂含辅料硬脂酸镁对非水溶液滴定法有干扰，则采用紫外-可见分光光度法测定含量。 1.4.2 注射剂的含量测定
若注射剂中主药在紫外-可见光区有特征吸收，当注射剂中无附加成分或附加成分不干扰，则主药的含量测定可直接采用紫外-可见分光光度法测定含量；当附加成分有干扰，则可采用消除干扰，或利用主药与附加成分紫外吸收光谱的差异，再进行紫外-可见分光光度法测定主药含量。如《中国药典》中马来酸氯苯那敏注射液的含量测定采用吸收系数法。
2 含量均匀度和溶出度的检查
溶出度系指药物从片剂或胶囊剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速度和程度。溶出度是固体制剂质量控制的一个重要指标。含量均匀度系指小剂量或单剂量的固体制剂、半固体制剂和非均相液体制剂的含量符合标示量的程度。
当药物可用紫外-可见分光光度法测定含量的，含量均匀度和溶出度的检查可采用紫外-可见分光光度法。如《中国药典》中吡哌酸片溶出度的测定和马来酸氯苯那敏片含量均匀度检查采用的就是紫外-可见分光光度法。
计算为：溶出度%=
紫外-可见分光光度法含量均匀度检查的计算与含量测定计算相同，只是结果判断方法不相同。
紫外-可见分光光度法不仅是化学药物原料药和制剂质量分析常用的方法，同时也用于中药、生物制品以及体内药物的质量分析。
参考文献
[1] 单松波，李敬，程杰.2014. 紫外分光光度计在制药生产中的应用. 化工生产与技术. 2014，21（1）：42-44.
[2] 李兰英， 郑国金. 2013. 紫外-可见分光光度计在药物分析中的应用. 中国医药指南. 2013，10（30）：295-297.
[3] 徐大光， 阴志刚， 侯小强等. 紫外-可见分光光度计在药物分析中的应用和进展. 中国医学物理学杂志. 2006，23（6）：432-464.
[4] 鲍延丰. 可见-紫外分光光度计在药物分析中的应用. 吉林医学信息. 2000，17（1）：15-15.
[5] 盖柯， 郑阿利， 荔瑞琴等. 紫外分光光度法测定小剂量阿司匹林肠溶片的含量. 中國医师， 2006，9（7）：643-644.
[6] 王雷， 李军， 王玮. 紫外分光光度法测定头孢哌酮注射剂含量. 齐鲁药事， 2004，23（8）：24-25.
[7] 王建新. 紫外分光光度法测定谷氨酸洛美沙星注射剂含量. 中国药业， 2003，12（8）：37-37.
[8] 张慧辉， 杨雪峰， 胡建和等. 紫外分光光度法测定恩诺沙星纳米乳含量方法的建立. 广东农业科学， 2013，3：92-94.
[9] 吴渝陵， 范虹， 罗凤琴. 紫外分光光度法测定水杨酸软膏中水杨酸的含量. 中国药业，2006，15（16）：19-19.
[10] 李华龙， 米亚娴. 紫外分光光度法测定电解质葡萄糖注射液（MG3、M3A、M3B、R2A、R4A）中的5-羟甲基糠醛. 天津药学， 2009，21（1）：18-20.
紫外-可见分光光度法是通过测定物质在紫外-可见光区（200-760nm）产生紫外-可见吸收光谱，根据吸收光谱的特性，对该物质进行定性和定量分析的方法。其理论基础为朗伯-比耳定律，溶液的吸光度和吸光物质含量、液层厚度乘积成正比。对于一般的紫外分光光度法，其测量的相对误差在1%～3%。随着大量心得显色剂的合成及应用，尤其是有关多元络合物和各种表面活性剂的应用研究，推进了元素测定的灵敏度的大幅提高。采用预富集和示差法，适用质量分数从常量（1%～50%）到痕量（10-10～10-8）。紫外-可见分光光度法由紫外分光光度法和可见分光光度法两种方法构成，这两种方法在测定的原理、仪器、操作等方面皆相同。因此，统称为紫外-可见分光光度法，测定仪器一般采用紫外-可见分光光度仪。
在各国药典中，药品的理化常数、鉴别、检查和含量测定等很多项目中，都能见到紫外分光光度法的应用实例。在制药生产中，紫外分光光度法应用最多的是药物含量的测定、药物杂质检测、药物稳定性考察、释放度、药物负载行为测定及物质结构鉴定等方面。
目前利用紫外分光光度计分析的药物品种有维生素、抗生素、解热药、去痛药、降血压药、安定药、镇咳药、滴眼药、磺胺类药、利尿药、某些妇科药、痢疾药、腹泻药、抗肿瘤药、抗结核药等。
1 紫外分光光度法应用于药物含量测定
紫外-可见分光光度法由于灵敏度较高，不仅可用于常量组分的含量测定，也可用于测定微量组分、超微量組分以及多组分混合物同时测定等，在药物分析中主要用于原料药含量测定、制剂含量测定、含量均匀度和溶出度的检查等。
1.1 含量测定的主要依据
朗伯-比耳定律是紫外-可见分光光度法含量测定的依据。朗伯-比耳定律是指单色光辐射穿过被测物质溶液时，在一定的浓度范围内被该物质吸收的量（A）与该物质的浓度（C）和液层的厚度（L）成正比，其关系如下式：
1.2 常用含量测定的方法
测定时，除另有规定外，应以配制供试品溶液的同批溶剂为空白对照，采用1cm的石英吸收池（紫外光区）或玻璃吸收池（可见光区），以吸收度最大的波长作为测定波长。一般供试品溶液的吸光度读数，以在0.3～0.7的误差最小。
1.2.1 吸收系数法
吸收系数法是利用待测物质的吸收系数与测得的一定浓度时的吸光度比较计算含量的方法，又称绝对法。该法是目前应用最多、最普遍的方法。用本法测定时，吸收系数通常应>100，并注意仪器的校正和检定。
1.2.2 对照品比较法
对照品比较法是采用在相同条件下分别配制供试品溶液和对照品溶液，对照品溶液中所含被测成分的量应为供试品溶液中被测成分规定量的（100±10）%，所用溶剂也应完全一致，在规定的波长处测定供试品溶液和对照品溶液的吸光度后，按下式计算供试品中被测溶液的浓度：
式中，CX为供试品溶液的浓度；AX为供试品溶液的吸光度；CR为对照品溶液的浓度；AR为对照品溶液的吸光度。
1.2.3 标准曲线法
标准曲线法是紫外-可见分光光度法中最经典的方法。测定时，先取与被测物质含有相同组分的标准品，配成一系列浓度不同的标准溶液，在相同条件下，分别测定其吸光度。然后以浓度C为横坐标，以相应的吸光度A为纵坐标，绘制A-C曲线。在相同条件下，测出供试品溶液的吸光度，从标准曲线上便可查出与此吸光度值对应的供试品溶液的浓度。
由于标准曲线对仪器的要求不高，因此是紫外-可见分光光度法中简便易行的方法。
1.2.4 比色法
测定能吸收可见光的有色物质、无色但经显色反应可以生成有色的物质都可以采用本法在适宜的条件下进行测定。比色法通常称为光电比色法，现代的比色分析采用分光光度计进行测定，故又称可见分光光度法。
除另有规定外，比色法所用的空白系指用同体积的溶剂代替，对照品或供试品溶液，然后依次加入等量的相应试剂，并用同样方法处理。在规定的波长处测定对照品和供试品的吸光度后，按对照品比较法计算供试品浓度。如《中国药典》中利血平注射液、硫酸阿托品片等一些药物和制剂的含量采用比色法测定。
1.3 紫外-可见分光光度法对原料药的含量测定
《中国药典》中原料药的含量用百分含量表示。
对照品对照法：含量
式中，CR为对照品溶液的浓度（g/mL）；Ax为供试品溶液的吸光度；AR为对照品溶液的吸光度；m为称取的供试品重量（g）；D为供试品的稀释倍数；V为供试品初次配制的体积（mL）。如奥沙西泮等原料药的含量测定《中国药典》中采用此法。
吸收系数法：含量%=
式中， 为供试品的百分吸收系数；其他符号意义与前面所述意义相同。如对乙酰氨基酚等原料的含量测定《中国药典》中采用此法。
1.4 紫外-可见分光光度法对制剂的含量测定
制剂的含量则用标示量的百分含量表示。
1.4.1 片剂的含量测定
由于片剂含量低，且含辅料，若采用原料药的方法测定含量则有干扰，当片剂中主药在紫外-可见光去有特征吸收光谱，则可采用灵敏度更高的紫外-可见分光光度法测定含量。如盐酸氟奋乃静为有机碱性药物，《中国药典》中原料药采用非水溶液滴定法，而片剂含辅料硬脂酸镁对非水溶液滴定法有干扰，则采用紫外-可见分光光度法测定含量。 1.4.2 注射剂的含量测定
若注射剂中主药在紫外-可见光区有特征吸收，当注射剂中无附加成分或附加成分不干扰，则主药的含量测定可直接采用紫外-可见分光光度法测定含量；当附加成分有干扰，则可采用消除干扰，或利用主药与附加成分紫外吸收光谱的差异，再进行紫外-可见分光光度法测定主药含量。如《中国药典》中马来酸氯苯那敏注射液的含量测定采用吸收系数法。
2 含量均匀度和溶出度的检查
溶出度系指药物从片剂或胶囊剂等固体制剂在规定溶剂中溶出的速度和程度。溶出度是固体制剂质量控制的一个重要指标。含量均匀度系指小剂量或单剂量的固体制剂、半固体制剂和非均相液体制剂的含量符合标示量的程度。
当药物可用紫外-可见分光光度法测定含量的，含量均匀度和溶出度的检查可采用紫外-可见分光光度法。如《中国药典》中吡哌酸片溶出度的测定和马来酸氯苯那敏片含量均匀度检查采用的就是紫外-可见分光光度法。
计算为：溶出度%=
紫外-可见分光光度法含量均匀度检查的计算与含量测定计算相同，只是结果判断方法不相同。
紫外-可见分光光度法不仅是化学药物原料药和制剂质量分析常用的方法，同时也用于中药、生物制品以及体内药物的质量分析。
参考文献
[1] 单松波，李敬，程杰.2014. 紫外分光光度计在制药生产中的应用. 化工生产与技术. 2014，21（1）：42-44.
[2] 李兰英， 郑国金. 2013. 紫外-可见分光光度计在药物分析中的应用. 中国医药指南. 2013，10（30）：295-297.
[3] 徐大光， 阴志刚， 侯小强等. 紫外-可见分光光度计在药物分析中的应用和进展. 中国医学物理学杂志. 2006，23（6）：432-464.
[4] 鲍延丰. 可见-紫外分光光度计在药物分析中的应用. 吉林医学信息. 2000，17（1）：15-15.
[5] 盖柯， 郑阿利， 荔瑞琴等. 紫外分光光度法测定小剂量阿司匹林肠溶片的含量. 中國医师， 2006，9（7）：643-644.
[6] 王雷， 李军， 王玮. 紫外分光光度法测定头孢哌酮注射剂含量. 齐鲁药事， 2004，23（8）：24-25.
[7] 王建新. 紫外分光光度法测定谷氨酸洛美沙星注射剂含量. 中国药业， 2003，12（8）：37-37.
[8] 张慧辉， 杨雪峰， 胡建和等. 紫外分光光度法测定恩诺沙星纳米乳含量方法的建立. 广东农业科学， 2013，3：92-94.
[9] 吴渝陵， 范虹， 罗凤琴. 紫外分光光度法测定水杨酸软膏中水杨酸的含量. 中国药业，2006，15（16）：19-19.
[10] 李华龙， 米亚娴. 紫外分光光度法测定电解质葡萄糖注射液（MG3、M3A、M3B、R2A、R4A）中的5-羟甲基糠醛. 天津药学， 2009，21（1）：18-20.