研究脱氧核糖核酸酶Ⅰ （deoxyribonuclease I, DNaseⅠ）在蔗糖环境下对不同生长时期变形链球菌生物膜的影响，初步探讨蔗糖环境下细胞外DNA (extracellular DNA，eDNA)对变形链球菌生物膜形成的作用。
方法在1％蔗糖环境下，体外光滑玻片上建立变形链球菌生物膜模型，37 ℃、微需氧环境（5%O2、85%N2、10% CO2）下静置培养。样本分为4组，分别培养至6、12、24及48 h，每组均设两个亚组，即对照组（不予DNaseⅠ处理）和DNaseⅠ处理组，其中DNaseⅠ处理组于结束培养前1 h加入终浓度为100 U/ml的DNaseⅠ以降解eDNA。培养结束后，以SYTO-9/PI混合染料对生物膜进行双荧光染色。以激光共聚焦显微镜分层扫描生物膜样本，Imaris软件对图像进行三维重建并测量其总生物量、生物膜厚度及红色荧光代表的eDNA和膜受损细菌量。
结果1％蔗糖环境下，变形链球菌黏附及分布密度逐渐增加，生物膜总生物量和厚度均随时间增加，24 h时红色荧光标记的eDNA及膜受损细菌量达峰值。6、12、24及48 h DNaseⅠ处理组的变形链球菌生物膜与相应时间点对照组相比，生物膜总生物量均显著减少（P<0.05），减少比例依次为81.3%、85.0%、90.1％和12.4%；12、24及48 h DNaseⅠ处理组变形链球菌生物膜与相应时间点对照组相比，生物膜厚度均显著减小（P<0.05），减小比例依次为34.4%、45.6％和23.6%，6 h DNaseⅠ处理组与对照组变形链球菌生物膜厚度差异无统计学意义（P>0.05）；除48 h外，各时间点DNaseⅠ处理组生物膜的eDNA及膜受损细菌量均较相应对照组显著减少（P<0.05）。
结论1％蔗糖环境下，在变形链球菌生物膜形成6、12、24及48 h，eDNA对其生物膜形成均具有促进作用。