贝类GI型扎幌样病毒荧光定量PCR检测

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目的 建立贝类中GI型扎幌样病毒的荧光定量PCR检测方法 .方法 通过用聚乙二醇6000(PEG6000)对贝类中扎幌样病毒进行浓缩,用序列比对软件设计出针对GI型扎幌样病毒保守序列的通用引物与探针,建立GI型扎幌样病毒荧光定量PeR检测方法 .结果 浓度为106~104,103,102~101拷贝/μL的GI扎幌样病毒检出率分别为3/3,1/3,0/3,因此,常规逆转聚合酶链反应(RT-PCR)最低检出限为103拷贝/μL.此荧光定量PCR方法 对贝类中GI型扎幌样病毒检测高度特异,最低检出限可达102拷贝/μL,比常规RT-PCR的低1个数量级,即灵敏度高10倍,线性范围为102~106拷贝/μL,标准曲线的相关系数为0.998 8.结论 本研究建立了GI型扎幌样病毒的荧光定量PCR检测方法 ,可用于贝类中GI型扎幌样病毒污染状况及其突发事件的快速定量检测.
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