泛种特异性单克隆抗体M26~32的分子生物学特性研究

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用含NKND四个氨基酸序列的特异性DNA探针筛选恶性疟原虫genomicDNA基因文库。阳性克隆的插入片段经PCR扩增,限制性内切酶消化后重组进M13噬菌体并进行序列测定和分析。获得6个阳性克隆,其插入片段450bp~1.3kb之间。其中661克隆的插入片段为477个碱基序列,其一端120bp与探针序列一端完全重叠。表明可合并组成一段含启动子、起始密码子和NKND四个氨基酸的678个碱基的单克隆抗体M26~32抗原决定簇基因片段。 Plasmodium falciparum genomic DNA gene library was screened with a specific DNA probe containing four amino acid sequences of NKND. The positive cloned insert was amplified by PCR, digested with restriction endonuclease, then recombined into M13 phage and sequenced and analyzed. Six positive clones were obtained, which inserted between 450bp and 1.3kb. The insert of 661 clones was 477 base pairs, with 120bp at one end completely overlapping with one end of the probe sequence. This indicates that a 678-base monoclonal antibody M26-32 epitope fragment comprising the four amino acids of the promoter, start codon and NKND can be combined.
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