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目的 探讨Ras鸟苷酸释放蛋白4(RasGRP4)是否直接参与自然杀伤细胞(NK细胞)调控干扰素-γ的分泌.方法 以RasGRP4基因敲除小鼠和C57BL/6野生型小鼠为研究对象,共24只.根据随机数字法随机分为C57 BL/6+生理盐水组、C57BL/6+脂多糖组、RasGRP4-/-+生理盐水组、RasGRP4-/-+脂多糖组,每组6只小鼠.采用流式细胞术微球阵列法分析两种小鼠在脂多糖免疫激活状态下血清干扰素-γ等免疫炎性因子水平;采用流式细胞术探讨RasGRP4基因敲除对小鼠外周血和脾细胞中主要干扰素-γ分泌细胞(NK细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞)比例的影响,以及在脂多糖激活2.5h时干扰素-γ+NK细胞、干扰素-γ+CD4+T细胞、干扰素-γ+CD8+T细胞的比例;分别提纯两种小鼠的NK细胞,比较其在脂多糖体外激活下干扰素-γ分泌能力.结果 与C57BI/6+生理盐水组和RasGRP4-/-+生理盐水组相比,C57BL/6+脂多糖组和RasGRP4-/-+脂多糖组白细胞介素(IL)-12p70、IL-10、肿瘤坏死因子-α、单核细胞趋化蛋白-1、IL-6、干扰素-γ较脂多糖激活前均显著升高(t ＝2.823 7～6.310 3,P均＜0.01).RasGRP4-/-+脂多糖组血清中干扰素-γ水平约是C57BL/6+脂多糖组的20％(t＝5.546 1,P＜0.01);尽管C57BL/6+生理盐水组和RasGRP4-/-+生理盐水组外周血、脾细胞中NK细胞、CD4+T细胞、CD8+T细胞的比例差异均无统计学意义(P均＞0.05),但在脂多糖激活状态下,RasGRP4-/-+脂多糖组外周血干扰素-γ+的NK1.1细胞比例仅为C57BL/6+脂多糖组的30％(t＝8.011 2,P＜0.01);而脾脏细胞中干扰素-γ+NK1.1的比例约为C57BL/6+脂多糖组的50％(t＝4.429 2,P＜0.01).在体外实验中,RasGRP4-/-来源的NK细胞在脂多糖刺激下细胞上清中干扰素-γ的水平为C57BL/6来源的30％(t＝5.522 8,P＜0.01).结论 RasGRP4在NK细胞分泌干扰素-γ的过程中起重要调控作用.