抗氯霉素单克隆抗体的制备及其化学发光酶免疫法的建立

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以人工合成的氯霉素-牛血清白蛋白(CAP-HS-BSA)免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术获得了一株分泌抗氯霉素单克隆抗体(CAP-McAb)的杂交瘤细胞5D7,并对其进行效价、亲和力和特异性测定.结果显示,其分泌的抗体亚类为IgG1,间接ELISA检测细胞培养上清效价为1∶512,诱生的腹水经纯化后效价为1∶2×105,亲和常数为3.6×108 L/mol;应用上述单抗建立的检测氯霉素的化学发光酶免疫分析法(ciCLIA),其检测范围为0.001 μg/L~10 μg/L,检出限达0.0025 μg/L,IC50为39.6 μg/L,且与L-苯丙氨酸、L-酪氨酸、青霉素、四环素、庆大霉素等的交叉反应率均小于0.01%,可满足我国对水产品中氯霉素残留检测的要求.
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