【摘 要】
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小热休克蛋白(small heat shock protein, sHSP)是一类受热处理后诱导产生的蛋白家族.从构建的家蚕蛹cDNA文库中获得了一条全长764 bp的基因序列(GenBank登录号:AAG30944.1),
【基金项目】
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国家重点基础研究发展规划(973计划);国家高技术研究发展计划(863计划)
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小热休克蛋白(small heat shock protein, sHSP)是一类受热处理后诱导产生的蛋白家族.从构建的家蚕蛹cDNA文库中获得了一条全长764 bp的基因序列(GenBank登录号:AAG30944.1),其开放阅读框(ORF)长561 bp,编码186个氨基酸.用生物信息学方法对此序列进行同源性分析,表明该序列是一条保守性高达85%的家蚕小热休克蛋白20.8(BmHSP20.8),无跨膜结构,主要分布于细胞质.将该序列的ORF与pET-28a(+)载体连接构建重组质粒,并转化到大肠杆菌BL21进行原核表达,纯化后的融合蛋白免疫新西兰大白兔获得抗血清.通过亚细胞定位技术研究BmHSP20.8在正常和热激状态下的家蚕卵巢上皮细胞Bm5和BmN中的变化,结果显示热激后BmHSP20.8蛋白从细胞质往细胞膜方向迁移.有BmHSP20.8表达的大肠杆菌菌株经48 ℃处理后,其生存率比未表达BmHSP20.8蛋白的菌株高4倍左右,说明BmHSP20.8蛋白在大肠杆菌中表达能够提高细菌体在高温环境下的生存率.
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