miRNA765体外抑制乳腺癌细胞 EMP3蛋白表达的研究

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目的:探讨微小核糖核酸-765(miRNA765)如何参与乳腺癌细胞上皮膜蛋白3(Epithelial membrane protein 3,EMP3)的表达调控。方法:应用 miRwalk 预测靶向 EMP3蛋白的 miRNA,应用定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测 EMP3的表达,通过荧光素酶报告基因系统验证 EMP3是 miR-765的靶基因,通过瞬时转染 miR-765 mimics 及 inhibitor 验证 miR-765对 EMP3表达的调控作用。结果:靶基因筛选结果表明,EMP3-3’UTR 区包含 miR-765的潜在结合位点。荧光报告载体实验表明 miR-765能够通过作用于 EMP3基因的3’UTR 区的特定位点对其表达进行负性调节;共转染 miR765 mimics 后,与对照组相比,含有野生型 EMP3-3’UTR 的报告质粒荧光素酶活性显著降低(P <0.05),含有突变型 EMP3-3’UTR 的报告质粒的荧光素酶活性无显著影响(P >0.05)。在 miR-765过表达的 SKBR3细胞中,EMP3基因的 mRNA 表达水平明显下降。结论:miR-765是参与乳腺癌细胞 EMP3转录的调控分子之一。
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