探讨磷脂转运蛋白(PLTP)在烟草提取物(CSE)诱导大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞株RLE-6TN发生上皮间质转化(EMT)中的作用。
方法体外培养RLE-6TN细胞株24 h,分为4组,每组3孔,分别加入0%、0.25%、0.5%和1% CSE培养2 d,检测E-钙黏蛋白和波形蛋白mRNA表达以及细胞和CSE共培养3 d检测PLTP、EMT相关蛋白(E-钙黏蛋白、N-钙黏蛋白和波形蛋白)的表达量。将siRNA-PLTP转染入RLE-6TN中,Western blot法检测CSE对转染后PLTP和EMT相关蛋白的影响。
结果不同浓度的CSE作用后,E-钙黏蛋白mRNA分别为1.01±0.05、0.74±0.05、0.65±0.03、0.30±0.08,呈浓度依赖下降;波形蛋白mRNA在1% CSE组(1.88±0.49)表达与对照组(1.01±0.20)相比增加。PLTP蛋白含量分别为0.42±0.02、0.89±0.25、1.08±0.18、1.61±0.06;E-钙黏蛋白蛋白含量分别为1.61±0.04、1.08±0.10、0.63±0.08、0.68±0.17;N-钙黏蛋白蛋白含量分别为0.60±0.15、0.57±0.26、0.88±0.30、1.94±0.54;波形蛋白蛋白含量分别为0.61±0.05、0.98±0.16、1.07±0.14、1.34±0.19。1%组与对照组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。siRNA- PLTP和CSE处理细胞后,E-钙黏蛋白蛋白表达量较对照组明显增加(P<0.05),N-钙黏蛋白和波形蛋白蛋白表达量较对照组明显降低(P<0.05),siRNA- PLTP可部分逆转CSE诱导RLE-6TN细胞发生上皮间质转化。
结论PLTP能促进烟草诱导RLE-6TN发生上皮间质转化。