【摘 要】
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乙酰胆碱酯酶(AChE)是有机磷农药残留检测的靶标酶,选取洋虫作为酶源,对AChE的提取方法进行优化.采用Sephadex G-200凝胶过滤层析对洋虫头胸部组织中的AChE粗酶液进行纯化,并
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乙酰胆碱酯酶(AChE)是有机磷农药残留检测的靶标酶,选取洋虫作为酶源,对AChE的提取方法进行优化.采用Sephadex G-200凝胶过滤层析对洋虫头胸部组织中的AChE粗酶液进行纯化,并对纯化前后的酶学性质进行研究.通过酶抑制法测定敌敌畏对洋虫AChE的抑制作用.研究表明,最适提取工艺为pH7.5、2.0%Triton X-100、料液比1:5(g/mL)、提取时间10h,此条件下,AChE纯化倍数为52.76,回收率为85.67%;采用SDS-PAGE法检测获得均一条带,且分子质量为78.6kD:在0.20～2μmol/L和3～10μmol/L的敌敌畏浓度区间内,农药浓度与抑制率呈现良好的线性关系,最低检出限达到(1.58±0.37)μg/L.
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