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【摘要】受近年来科学技术发展的影响,在水稻种植方面也逐渐应用了相应的高科技技术,DNA指纹检测技术便是其中的一种。文章中围绕水稻品种DNA指纹检测技术体系,以及技术体系的应用进行了分析,并以此提出了相应的建议。
【关键词】水稻品种;DNA指纹检测技术;运用
从20世纪后期以来,在种子法与植物新品种相关保护条例实施的环境下,我国的农作物其中包括水稻在内的种子行业实现了快速的发展,并且品种也在不断增加,以此也逐渐出现了一些品种雷同的现象。当前阶段因为我国在植物新品种检测方面的技术仍然存在一定的发展空间,为此则会在新品种的检测上存在一定的不足。近年来,受科学技术发展的影响,DNA指纹检测技术逐渐实现了自身的发展,同时也在水稻品种的检验等工作中实现了广泛的应用。为此,文章中则主要针对水稻品种DNA指纹检测技术体系,以及其具体运用进行了分析。
一、水稻品种DNA指纹检测技术体系
(一)确定标记的种类
现阶段,DNA分子标记的发展十分迅速,不仅包括RFLP标记,同时也在其基础上发展了众多分子标记。该标记种类也具备了不同的特点:其中,RFLP是最为经典的分子标记形式,其本身具有很好的重演性以及共显性遗传的特点;而AFLP的分子标记信号形式则具有较高的多态性以及稳定性;RAPD尽管比较简单,但是却又DNA量少、实验周期短的优势,然而该类型的分子标记同时也是显性标记的一种,并且对于反应条件比较敏感。当前阶段,微卫星标记技术已经在不断的探究与探索中趋于成熟,并且进行水稻品种鉴定的过程中也能够反映出廣阔的应用前景。为此,则可以将微卫星标记作为水稻品种DNA指纹检测技术的主要标记类型。
(二)标记的筛选
经过相关的研究得知,针对普通的水稻品种,运用12个微卫星标记便可以将不同种类进行区分,针对具有较高相似度的品种,也可以使用24个微卫星标记对其实施检测,然而增加标记数在提升检测的分辨率方面却没有发挥较大的作用。为此,根据带型清晰、重演性好等基本准则,可以筛选24个微卫星标记进行水稻品种的鉴定,将其分布于水稻的12条染色体中,以此实现对水稻品种的检测。
(三)记录带型指纹
各标记等位基因针对分子量由大至小按照1-5的顺序进行编号,针对检测当中存在的等位基因,按照以上规则将其进行编号,原有的等位基因编号便会出现变化,将1与0分别代表已经完成检测与未检测的等位基因,对待检品种的等位基因进行记录。
二、水稻品种DNA指纹检测技术体系的运用成效
(一)指纹标记检测与建立水稻品种DNA指纹数据库
各个首选标记PCR扩增产物一共上样在13块凝胶中,各个胶上分别包含了100bpDNA的分子量Marker以及标准带型对照与待测品种,其中待测品种为编号标识。随后进行品种带型的记录,并在记录的过程中对最新发现等位基因进行判定。整理所记录的带型数据,在此基础上建立水稻品种首选标记为主的DNA指纹数据库。在指纹库中一共涵盖了400余条记录,其中各条记录中分别对ID、年份、水稻品种以及品种编号等参数进行了记录。
(二)进行水稻品种独特性的检测
在所建立的水稻品种首选标记的DNA指纹数据库中,针对指纹数据库中所包含的所水稻品种将其分别进行比对,通过对比会发现所对比的水稻品种中,其中也存在品种间带型一致的现象。在对之前所检测的几组品种中,只是发现其中的几组带型不一致,将该品种排除,剩余的品种在全部的候补标记中也未发现其存在的差异。随后进行检测的几组水稻品种在不同年份的待测品种中,其组内带型一致。最后,根据首选标记对其进行判断,发现其中有几组水稻品种之间的独特性并不十分明显。为了对DNA指纹检测技术在水稻品种独特性检验中的准确性进行判定,可以通过水稻指纹检测的形式对所测定的几组品种进行测试,以此判定结果和DNA指纹检测的结论一致,同时这也表明了DNA指纹检测技术在水稻品种独特性的鉴定方面是具有可靠性与准确性的。
(三)进行续试品种一致性的检测
根据水稻品种检测的相关规定可知,在针对一个水稻品种进行区域试验的时间,务必要大于两年,并且续试品种在一年之间不能够存在不一致的现象。之前南方部分地区在进行水稻区试总共有续试品种约72个,在这其中有60个已经接受了DNA指纹检测,根据DNA指纹数据库显示,将检测鉴定的结果进行对比,从中发现其中有7个品种的检测带型具有差异性,这也对DNA指纹检测技术的鉴定方面是具有可靠性与准确性进行了验证。
结束语
文章中针对水稻品种DNA指纹检测技术体系,对其运用成效进行了阐述,希望能够通过文章中的分析,实现DNA指纹检测技术的广泛运用,提升技术水平,以此不断推动我国农作物行业的发展。
参考文献:
[1]程本义,施勇峰,沈伟峰,庄杰云,杨仕华. 水稻品种DNA指纹检测技术体系及其应用[J]. 杂交水稻,2008,01:54-59.
[2]王忠华. DNA指纹图谱技术及其在作物品种资源中的应用[J]. 分子植物育种,2006,03:425-430.
[3]程本义,吴伟,夏俊辉,刘鑫,庄杰云,杨仕华. 浙江省水稻品种DNA指纹数据库的初步构建及其应用[J]. 浙江农业学报,2009,06:555-560.
作者简介:莫洁华,1983年1月,性别女,广东省阳江市,研究生,职称农艺师,研究方向农作物种子及其产品的转基因和真实性检测。
【关键词】水稻品种;DNA指纹检测技术;运用
从20世纪后期以来,在种子法与植物新品种相关保护条例实施的环境下,我国的农作物其中包括水稻在内的种子行业实现了快速的发展,并且品种也在不断增加,以此也逐渐出现了一些品种雷同的现象。当前阶段因为我国在植物新品种检测方面的技术仍然存在一定的发展空间,为此则会在新品种的检测上存在一定的不足。近年来,受科学技术发展的影响,DNA指纹检测技术逐渐实现了自身的发展,同时也在水稻品种的检验等工作中实现了广泛的应用。为此,文章中则主要针对水稻品种DNA指纹检测技术体系,以及其具体运用进行了分析。
一、水稻品种DNA指纹检测技术体系
(一)确定标记的种类
现阶段,DNA分子标记的发展十分迅速,不仅包括RFLP标记,同时也在其基础上发展了众多分子标记。该标记种类也具备了不同的特点:其中,RFLP是最为经典的分子标记形式,其本身具有很好的重演性以及共显性遗传的特点;而AFLP的分子标记信号形式则具有较高的多态性以及稳定性;RAPD尽管比较简单,但是却又DNA量少、实验周期短的优势,然而该类型的分子标记同时也是显性标记的一种,并且对于反应条件比较敏感。当前阶段,微卫星标记技术已经在不断的探究与探索中趋于成熟,并且进行水稻品种鉴定的过程中也能够反映出廣阔的应用前景。为此,则可以将微卫星标记作为水稻品种DNA指纹检测技术的主要标记类型。
(二)标记的筛选
经过相关的研究得知,针对普通的水稻品种,运用12个微卫星标记便可以将不同种类进行区分,针对具有较高相似度的品种,也可以使用24个微卫星标记对其实施检测,然而增加标记数在提升检测的分辨率方面却没有发挥较大的作用。为此,根据带型清晰、重演性好等基本准则,可以筛选24个微卫星标记进行水稻品种的鉴定,将其分布于水稻的12条染色体中,以此实现对水稻品种的检测。
(三)记录带型指纹
各标记等位基因针对分子量由大至小按照1-5的顺序进行编号,针对检测当中存在的等位基因,按照以上规则将其进行编号,原有的等位基因编号便会出现变化,将1与0分别代表已经完成检测与未检测的等位基因,对待检品种的等位基因进行记录。
二、水稻品种DNA指纹检测技术体系的运用成效
(一)指纹标记检测与建立水稻品种DNA指纹数据库
各个首选标记PCR扩增产物一共上样在13块凝胶中,各个胶上分别包含了100bpDNA的分子量Marker以及标准带型对照与待测品种,其中待测品种为编号标识。随后进行品种带型的记录,并在记录的过程中对最新发现等位基因进行判定。整理所记录的带型数据,在此基础上建立水稻品种首选标记为主的DNA指纹数据库。在指纹库中一共涵盖了400余条记录,其中各条记录中分别对ID、年份、水稻品种以及品种编号等参数进行了记录。
(二)进行水稻品种独特性的检测
在所建立的水稻品种首选标记的DNA指纹数据库中,针对指纹数据库中所包含的所水稻品种将其分别进行比对,通过对比会发现所对比的水稻品种中,其中也存在品种间带型一致的现象。在对之前所检测的几组品种中,只是发现其中的几组带型不一致,将该品种排除,剩余的品种在全部的候补标记中也未发现其存在的差异。随后进行检测的几组水稻品种在不同年份的待测品种中,其组内带型一致。最后,根据首选标记对其进行判断,发现其中有几组水稻品种之间的独特性并不十分明显。为了对DNA指纹检测技术在水稻品种独特性检验中的准确性进行判定,可以通过水稻指纹检测的形式对所测定的几组品种进行测试,以此判定结果和DNA指纹检测的结论一致,同时这也表明了DNA指纹检测技术在水稻品种独特性的鉴定方面是具有可靠性与准确性的。
(三)进行续试品种一致性的检测
根据水稻品种检测的相关规定可知,在针对一个水稻品种进行区域试验的时间,务必要大于两年,并且续试品种在一年之间不能够存在不一致的现象。之前南方部分地区在进行水稻区试总共有续试品种约72个,在这其中有60个已经接受了DNA指纹检测,根据DNA指纹数据库显示,将检测鉴定的结果进行对比,从中发现其中有7个品种的检测带型具有差异性,这也对DNA指纹检测技术的鉴定方面是具有可靠性与准确性进行了验证。
结束语
文章中针对水稻品种DNA指纹检测技术体系,对其运用成效进行了阐述,希望能够通过文章中的分析,实现DNA指纹检测技术的广泛运用,提升技术水平,以此不断推动我国农作物行业的发展。
参考文献:
[1]程本义,施勇峰,沈伟峰,庄杰云,杨仕华. 水稻品种DNA指纹检测技术体系及其应用[J]. 杂交水稻,2008,01:54-59.
[2]王忠华. DNA指纹图谱技术及其在作物品种资源中的应用[J]. 分子植物育种,2006,03:425-430.
[3]程本义,吴伟,夏俊辉,刘鑫,庄杰云,杨仕华. 浙江省水稻品种DNA指纹数据库的初步构建及其应用[J]. 浙江农业学报,2009,06:555-560.
作者简介:莫洁华,1983年1月,性别女,广东省阳江市,研究生,职称农艺师,研究方向农作物种子及其产品的转基因和真实性检测。