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探究坏死性凋亡相关蛋白大脑中动脉栓塞(MCAO)在脑组织缺血再灌注小鼠脑损伤中的作用及其机制。
方法通过大脑中动脉栓塞(MCAO)构建C57BL/6小鼠缺血再灌注损伤模型，分别使用凋亡抑制剂z-VAD.fmk(zVAD，1.1 g/kg)、受体相互作用蛋白3(RIP3)抑制剂GSK’872(0.7 g/kg)以及二者联合进行干预，采用mNSS评估神经功能缺损状况，TTC染色检测脑组织梗死体积，免疫印迹(Western Blot)和免疫荧光法分析受体相互作用蛋白1(RIP1)、RIP3和混合系列蛋白激酶样结构域(MLKL)表达变化和定位情况。
结果MCAO小鼠发生明显的神经功能缺损和脑组织梗死，与MCAO组比较，zVAD、GSK’872及二者联合均能缓解神经功能缺损，降低脑组织梗死体积(P<0.05或P<0.01)。MCAO引起RIP1、RIP3和MLKL蛋白水平升高，而GSK’872以及联合干预能够明显下调上述蛋白表达[RIP1(GSK’872：0.64±0.02，MCAO：1.28±0.02，P<0.01)；RIP3(GSK’872：1.08±0.02，MCAO：1.45±0.02，P<0.01)；MLKL(GSK’872：0.54±0.01，MCAO：1.00±0.01，P<0.01)]，但是zVAD除导致MLKL轻度降低外(P<0.05)，并未引起RIP1和RIP3表达变化(P>0.05)。
结论坏死性凋亡相关蛋白RIP1、RIP3与MLKL参与介导坏死性凋亡的发生，促进脑组织缺血再灌注损伤的病理进展。