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胚胎干细胞（ES cell）嵌合体制备在发育生物学，功能基因组学等研究领域发挥越来越重要的作用。其技术本身随着干细胞生物学，体细胞核移植技术进步而不断发展。但其制备过程受ES细胞，宿主囊胚遗传背景、生存状态及嵌合体制备程序等诸多因素影响，导致ES细胞嵌合体的制备程序颇为复杂。本文将对ES细胞嵌合体小鼠制备技术的最新进展作一综述。