【摘 要】
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目的 探讨靶向作用于乙型肝炎病毒C区基因的M1GS RNA核酶胞内抗乙型肝炎病毒的作用.方法 设计并应用PCR技术合成M1 RNA核酶,应用pEGFP-C1载体构建M1GSRNA核酶的真核表达质粒,
【机 构】
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青岛大学医学院附属医院消化内科,青岛,266003;青岛大学医学院微生物学教研室
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目的 探讨靶向作用于乙型肝炎病毒C区基因的M1GS RNA核酶胞内抗乙型肝炎病毒的作用.方法 设计并应用PCR技术合成M1 RNA核酶,应用pEGFP-C1载体构建M1GSRNA核酶的真核表达质粒,应用脂质体Lipofectamine TM 2000转染HepG2.2.15细胞,以ELISA法检测细胞培养液中病毒抗原.以反转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测细胞内病毒mRNA,以荧光定量PCR法检测分泌人培养液的HBV DNA含量,用MTT法检测核酶对细胞增殖活性的影响.结果 质粒载体表达的M1GS RNA核酶能明显抑制细胞培养液中HBeAg的表达及病毒mRNA的表达,抑制率分别为31.58%,32.5%.但M1GS RNA核酶对培养液中的HBV DNA含量无明显影响,亦不影响HepG2.2.15细胞的增殖活性.结论 M1GS RNA核酶能特异性抑制HepG2.2.15细胞内HBV C区基因表达,是一种很有潜力的抗HBV基因治疗方法.
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